在哺乳动物中,T淋巴细胞表面分子标记CD4和CD8将T细胞分为辅助性T细胞和细胞毒性T细胞两种主要亚群。具体地,CD4和CD8分子分别通过与自身M H CⅠ类分子和Ⅱ类分子的恒定区结合,加强T细胞与APC或靶细胞的相互作用以及TCR-CD3信号的转导。为获悉它们在鱼类的分子结构和可能的功能信息,本课题克隆了草鱼CD4L、CD8α和CD8β基因,得到了它们的全长cDNA序列。预测的蛋白质拥有和哺乳动物以及其它鱼类相似的结构,例如都含有免疫球蛋白超家族成员。通过半定量PCR我们检测到CD4L、CD8α和CD8β基因在草鱼胸腺中有最高表达量,其次在鳃、头肾、肾和小肠等其它免疫相关组织中有高表达。为进一步明确CD4L、CD8α和CD8β的免疫学功能,本课题以草鱼外周血淋巴细胞(PBLs)为模型,发现PHA明显上调T细胞的表面分子标记CD4L、CD8α和CD8β的mRNA水平的表达,然而LPS无此作用。这一结果验证了PHA和LPS分别特异作用于鱼类T和B淋巴细胞的性质。NF-κB信号通路对于哺乳动物T细胞的功能至关重要,而且不同的NF-κB家族成员在T细胞中发挥不同的作用,因此研究NF-κB信号通路十分必要。本课题克隆了草鱼NF-κB信号通路中的抑制蛋白IκBα,进一步在草鱼PBLs中,发现LPS从3 h开始刺激IκBα的表达,12 h后达到顶峰然后衰减,这和哺乳动物中的IκBα的自调控作用方式是一致的。而PHA从1 h开始呈现持续上调IκBα的表达。结果还显示NF-κB的抑制剂可以抑制LPS和PHA对IκBα的上调作用;LPS可以促进IκBα的磷酸化,但PHA没有该作用。上述结果表明LPS和PHA通过NF-κB分别调节B细胞和T细胞,但参与的NF-κB信号通路细节又有区别。