运用组织芯片研究整合素连接激酶在喉鳞状细胞癌中的表达及意义

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喉鳞状细胞癌(Laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)是头颈部常见的恶性肿瘤,其发病率逐年上升。从基因水平探索肿瘤的发生、发展、转移及治疗是目前的研究热点。新的观点认为细胞癌变是由于信号转导途径异常,细胞接受了异常生长、增殖、分化信号所致。整合素连接激酶(Integrin-linked kinase,ILK)是一种新发现的Ser/Thr蛋白激酶,它能参与整合素、生长因子和Wnt等多种信号通路,对细胞的生长、分化、迁移等多个方面进行调控。在多种癌组织研究中,ILK被证明是一个癌基因,与肿瘤细胞的持续增殖、粘附性丧失、迁移以及血管的生成都有密切的联系,参与了肿瘤发生机制中的许多过程,成为一个非常具有吸引力的肿瘤基因治疗研究对象,是一个抗肿瘤药物设计的理想靶点。组织微阵列/组织芯片技术是最近伴随基因芯片技术发展起来的一种新方法,可大规模高效检测临床组织样本,具有快速、方便、经济、准确的特点。目的:本实验将组织芯片技术运用于喉癌组织的免疫组织化学研究中,了解整合素连接激酶(intergrin-linked kinase ILK)在喉鳞状细胞癌中的表达情况,与临床分期、病理分级和淋巴结转移等特征之间的关系,并探讨其意义。方法:通过组织芯片打孔仪将36例喉癌组织和18例癌旁组织标本按照预先设计集中到同一个受体蜡块中,制成组织微阵列蜡块,经切片和烤片后即成为组织芯片。将组织芯片技术用于免疫组织化学SP法,检测ILK在36例喉癌及18例癌旁组织标本中的表达。利用SPSS统计学软件及x~2检验进行统计学分析。结果:1.运用本方法制备的中等密度组织芯片,排列整齐,外形美观,组织点大小一致。HE染色结果均一,核浆对比明显,便于进行诊断和比较诊断。IHC染色清晰,便于观察和诊断。2.ILK在喉鳞状细胞癌组织和癌旁组织中的表达率分别为69.44%(25/36)和22.22%(4/14),癌组织中的表达率明显高于癌旁组织,两组间有显著差异(P<0.01)。3.ILK高分化鳞癌组织中的表达率为56.52%(13/23),而在中低分化鳞癌中的表达率为92.31%(12/13),两者之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。4.有淋巴结转移的癌组织和无淋巴结转移的癌组织中的ILK的表达率分别为88.24%(15/17)和52.63%(10/19),两组有显著差异(P<0.01)。5.Ⅰ—Ⅱ期喉癌组织中ILK的表达率为66.67%(8/12),而在Ⅲ—Ⅳ期喉癌组织中为70.83%(17/24),两者之间比较没有明显的统计学意义(P>0.05)。ILK在声门上型喉癌组织中表达率为72.73%(8/11),在声门型喉癌组织中表达率为66.67%(16/24)。两者之间的差异没有明显的统计学意义(P>0.05)。结论:1.组织芯片制备是一种比较成熟的技术。运用组织微阵列技术有快速、高精确度、节约资源,标准化等特点。2.我们的研究表明ILK在喉鳞状细胞癌中的表达明显高于癌旁组织。ILK的表达与喉鳞状细胞癌的恶性程度及淋巴结转移有关,ILK很可能参与了喉癌的发生、发展及侵袭过程。
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