论文部分内容阅读
近年来有关鱼类免疫系统形态结构和功能的研究日益受到重视,本文致力于大黄鱼(Pseudosciaenacrocea)免疫系统形态结构、发生和感染病理反应的研究。对鱼类免疫系统的研究,不仅有利于揭示脊椎动物免疫系统的进化规律,而且对鱼类的健康养殖和可持续发展有着重要的应用价值。论文取得如下主要结果:
1、大黄鱼是我国重要的海水经济鱼类。本文首次全面系统地研究了大黄鱼的免疫系统,包括头肾、脾脏、胸腺以及粘膜样淋巴组织(鳃)的组织结构和细胞特征。大黄鱼的头肾主要集中于肾脏前部2个分叉部分:组织学研究证明,头肾是由基质组织网络着不同发育阶段的血细胞构成,无肾小球等分泌结构。超微观察进一步表明,基质是由网状细胞和成纤维细胞等组成,各种免疫细胞由淋巴细胞、单核细胞、Ⅰ型颗粒细胞和Ⅱ型颗粒细胞以及巨噬细胞等组成。大黄鱼头肾内免疫细胞种类比较丰富,是免疫细胞的主要生发中心。大黄鱼脾脏实质无明显的红髓和白髓区分。胸腺无明显的内区和外区之分。
大黄鱼的鳃小片主要由扁平上皮细胞和柱状细胞构成,血窦腔极为发达。血窦内主要为红细胞,免疫细胞包括淋巴细胞、单核细胞和颗粒细胞,此外,还有泌氯细胞和粘液细胞。研究结果表明,大黄鱼鳃的免疫区位于鳃小片基部,鳃在局部粘膜免疫中具有重要作用,是鱼类免疫体系的有机组成部分之一。
2、研究了大黄鱼免疫系统发生。应用显微与超微技术研究了大黄鱼初孵仔鱼至60日龄幼鱼的免疫器官—头肾、胸腺与脾脏的发育。结果表明,免疫器官原基出现的先后顺序是头肾、脾脏和胸腺。3日龄仔鱼出现头肾原基,4日龄仔鱼出现脾脏和胸腺原基。免疫器官出现小淋巴细胞顺序是胸腺、头肾和脾脏,淋巴组织的发育相对滞后。在大黄鱼仔鱼早期发育阶段,非特异性免疫系统起着重要作用。
3、系统地研究了初孵仔鱼至12月龄大黄鱼头肾、脾、胸腺等免疫系统的发育变化,阐明了免疫器官发育与年龄、体重的关系。除了胸腺之外,大黄鱼所有免疫器官都随着鱼龄的增长而生长。免疫器官的重量与体重的关系要比与年龄的关系密切。免疫器官内总的白细胞数量随着年龄增长而增加。显微和超微结构研究都表明,大黄鱼免疫器官发育直到幼鱼阶段才逐步完善。脾脏和头肾有混合的红细胞和白细胞群,头肾比脾脏的淋巴化程度高。胸腺在孵化后12个月内没有退化现象。
4、采用蛋白A亲和层析法对大黄鱼血清中的特异性免疫球蛋白(IgM)进行分离纯化,所得产物用SDS—PAGE进行检测。结果表明,蛋白A亲和层析法可以较好地分离到高纯度的大黄鱼血清IgM,产物的电泳胶中只有重链和轻链2个条带;大黄鱼免疫球蛋白重链的分子量约69kDa,轻链分子量约28kDa。
5、研究了大黄鱼感染哈维氏弧菌后免疫系统组织病理学及血清中生化指标变化。对患病大黄鱼的病理组织学的研究发现被感患病大黄鱼头肾、脾、胸腺、肝和粘膜性淋巴组织肠等组织的出现不同程度的病变,具体表现为肾小管上皮细胞和脾内细胞变性、坏死,胸腺中出现较多空泡,肝细胞胞浆内脂滴积累增多,肠粘膜上皮细胞坏死、脱落。
大黄鱼血清中生化指标检测表明,患病大黄鱼血清中Ca+、K+、Cl—浓度上升,而Na+浓度略有下降,谷丙转氨酶和谷草转氨酶含量急剧增加,而血清总蛋白和胆固醇含量相对减少。患病大黄鱼血液白细胞的淋巴细胞增加较多。研究结果表明,大黄鱼血液白细胞数量和血液生化参数的变化可以作为疾病早期诊断的良好指标。