小叶金钱草化学成分分离鉴定及生物活性研究

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小叶金钱草(Hydrocotyle sibthorpioides Lam.),为伞形科天胡荽属植物天胡荽,中国传统中药之一。论文主要工作如下:1、电喷雾质谱对乙酸乙酯萃取物化学成分的初步鉴定。2、化学成分分离(层析柱色谱和高速逆流色谱分离)。3、波谱表征及结构解析。4、抗炎活性研究。研究取得了以下研究成果和结论。1通过色谱质谱联用对小叶金钱草乙酸乙酯萃取物的化学组成进行研究。以色谱峰信息(紫外光谱、质谱数据)、质谱数据库(天然有机化学质谱图集)提供的信息,对化学成分做出初步鉴定。2经HPLC分析,采用葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)对小叶金钱草乙酸乙酯萃取物进行初步分离。联合HSCCC分离制备,采取正己烷-正丁醇-水溶剂体系对样品进行分离。最终从中分离得到14种单体化合物,经1H NMR和13C NMR鉴定为:香草酸(1)、4-羟基苯甲酸(2)、原儿茶酸(3)、没食子酸(4)、槲皮素(5)、山柰酚(6)、木犀草素(7)、芹菜素(8)、杨梅苷(9)、槲皮苷(10)、紫云英苷(11)、杨梅素3-O-半乳糖苷(12)、异杨梅树皮苷(杨梅素3-O-葡萄糖苷)(13)和槲皮素3,3’-二-α-L-鼠李糖苷(16)。3采用DM 301型大孔树脂粗分、葡聚糖凝胶纯化、反相硅胶层析分离,结合梯度HSCCC从正丁醇萃取物中分离得到4种单体化合物。通过梯度HSCCC对分配系数差异较大的化合物15和化合物17进行分离,并在溶剂中添加冰乙酸来改善物质的分配系数,为黄酮苷类化合物分离提供方法学参考。所得化合物经1H NMR和13C NMR鉴定为:木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(14)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(15)、槲皮素3,3’-二-α-L-鼠李糖苷(16)和杨梅素3,3’-二-α-L-鼠李糖苷(17)。4经脂多糖(LPS)诱导小鼠单核巨噬细胞(RAW 264.7),使用ELISA试剂盒测试单体化合物对RAW 264.7中肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素(IL-6)的抑制水平。结果表明化合物2具有较强的抗炎活性,且有机酸类化合物活性要高于黄酮类化合物。
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