狂犬病是由狂犬病病毒感染导致的致死性人兽共患传染病。狂犬病持续威胁温血动物生命,尤其是在亚洲和非洲有较高的人和动物狂犬病发病率,因此在狂犬病高发区,狂犬病病毒感染不仅造成经济损失,更会产生严重性的公共卫生安全问题。狂犬病病毒的宿主主要是家养动物（犬、猪、牛、马、羊等）及野生动物。近年来,多有家养动物及宠物咬伤人类从而感染狂犬病病毒的报道。一旦发病,由于病毒侵入的是中枢神经系统,导致病死率为100%,是人类病死率最高的急性传染病。狂犬病病毒没有特定的动物宿主。狂犬病病毒的结构蛋白共有五个:核蛋白、磷蛋白、基质蛋白、糖蛋白和RNA聚合酶大蛋白。当狂犬病病毒侵入到脑中枢神经系统时,可以导致机体发生致死性脑神经炎。而狂犬病病毒糖蛋白（G）能诱导宿主产生中和性抗体（Neutralizing antibody）,可有效的刺激T淋巴细胞的大量产生,狂犬病病毒糖蛋白中和抗体可有效中和游离的病毒,进而抑制病毒的入侵和复制。糖蛋白能保护受体并阻挡狂犬病病毒的对受体脑内攻击,由于狂犬病病毒的G蛋白在病毒入侵和免疫保护方面的重要作用,使之成为研究最为深入的一种蛋白。近年来,研究者主要集中在建立和筛选具有中和活性的Mc Ab。本研究筛选了一株有效的G蛋白单克隆抗体,对研究狂犬病病毒G蛋白的功能、狂犬病病毒感染的诊断、狂犬病病毒疫苗的研发、狂犬病抗病毒药物的筛选都是必不可少的。本试验为了制备一种抗狂犬病病毒G蛋白单克隆抗体,通过密度梯度离心法纯化弱毒疫苗ERA株全病毒,经肌肉注射途径免疫BALB/c小鼠,经3次常规免疫及一次加强免疫后,取小鼠脾细胞同骨髓瘤细胞进行融合培养,培养上清通过IFA方法筛选抗狂犬病病毒G蛋白单克隆抗体,经3～4次亚克隆,得到稳定分泌抗狂犬病病毒G蛋白单克隆抗体,并制备腹水,最终筛选出2株单抗,命名为G3E8和G4G12;单克隆抗体亚类均为小鼠Ig G3;经Western bolt鉴定,抗狂犬病病毒G蛋白单克隆抗体可以与全病毒发生反应,且反应条带为67k Da;病毒中和实验证明量两株单抗均具有狂犬病病毒中和活性;两株单抗分数两个不同的G蛋白抗原表位。本试验成功制备抗狂犬病病毒G蛋白单克隆抗体,并对单克隆抗体的生物学信息进行了全面鉴定。本研究旨在制备具有高中和活性的狂犬病病毒G蛋白单克隆抗体,为狂犬病病毒入侵宿主机制研究、狂犬病病毒中和抗体定量检测试剂盒的研制和暴露后狂犬病病毒的抗病毒治疗奠定了基础。