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第一部分FLT3基因突变急性髓系白血病患者的临床特征与预后目的:分析急性髓系白血病（AML）患者Fms样酪氨酸激酶3（FLT3）基因酪氨酸激酶结构域（TKD）点突变、内部串联重复（ITD）突变及双突变患者的骨髓MICM分型及分子遗传学特征;FLT3基因突变与其他急性髓细胞白血病常见基因突变的联系;评估异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）及酪氨酸激酶抑制剂（TKIs）对伴有FLT3基因突变AML患者的治疗效果。方法:收集200例2010年09月至2016年09月收治于苏州大学附属第一医院初诊FLT3基因突变AML患者（急性早幼粒细胞白血病除外）的临床资料,观察在AML中FLT3基因突变与DNMT3A、NPM1等突变重叠的情况及与临床特征的关系;并对FLT3基因突变AML患者allo-HSCT、TKIs的治疗效果进行分析。结果:1)200例FLT3基因突变AML患者中,FLT3-ITD+/TKD-患者149例,FLT3-ITD-/TKD+患者32例,FLT3-ITD+/TKD+患者19例。三者间在性别、年龄、血象、骨髓原始细胞比例以及FAB亚型分型上无显著差异（P>0.05）。FLT3-ITD-/TKD+患者多出现于预后良好核型,FLT3-ITD+/TKD-及FLT3-ITD+/TKD+患者多见于预后中等核型（P=0.001）。2)其中101例患者（50.5%）合并一种或以上其他常见的AML突变,依次为NPM1突变76例（38%）,DNMT3A突变34例（17%）,CEBPA突变15例（7.5%）,C-KIT突变5例（2.5%）。3)（1）.FLT3-ITD-/TKD+AML患者的中位生存时间及中位完全缓解时间较FLT3-ITD+/TKD-及FLT3-ITD+/TKD+AML患者均明显延长（P=0.031,P=0.033;P=0.019,P=0.003）;FLT3-ITD+/TKD-与FLT3-ITD+/TKD+AML患者相比中位生存时间无差异（P=0.513）,但中位完全缓解时间明显延长（P=0.018）。（2）.FLT3-ITD+/TKD-及FLT3-ITD+/TKD+AML患者中接受造血干细胞移植者中位生存时间及完全缓解时间均较行高剂量巩固化疗者明显延长（P=0.001,P=0.021;P=0.013,P=0.019）。（3）.19/37例复发难治FLT3基因突变阳性AML患者在接受索拉非尼再诱导治疗后可获得完全缓解,9/37例患者可获得部分缓解。联合索拉非尼治疗组FLT3基因突变阳性患者的中位生存时间及完全缓解时间与未联合索拉非尼治疗组无统计学差异（P=0.062;P=0.209）。结论:FLT3基因突变是AML患者中常见的基因突变类型,该类患者具有特殊的临床表现及实验室特征,且常与其他AML突变共存,宜早期接受allo-HSCT,复发难治FLT3基因突变AML患者可联合TKIs治疗再诱导治疗。FLT3基因ITD、TKD双突变患者预后较差,需进一步探索其治疗手段。第二部分PD-1和TIM3及相关配体在FLT3-ITD+急性髓系白血病中的表达及作用机制研究目的:动态分析负性共刺激分子PD-1、TIM3在FLT3-ITD+急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）患者外周血T细胞上的表达特征,检测PD-1的配体PD-L1及TIM3的配体Galectin-9（Gal-9）在FLT3-ITD+AML患者外周血中的表达水平,以进一步探讨PD-1、TIM3在T细胞表达的临床意义及PD-1/PD-L1、TIM3/Gal-9通路介导的AML免疫逃逸机制。方法:收集我院收治的经骨髓MICM分型明确诊断的FLT3基因突变AML患者42例的临床资料,其中FLT3-ITD+20例、野生型FLT3（wt FLT3）患者22例,并采集同期化疗后缓解和/或未缓解AML患者及20例健康志愿者的EDTA抗凝外周血,首先采用免疫荧光标记和流式细胞仪检测技术,动态分析PD-1、TIM3在FLT3-ITD+AML患者外周血T细胞上的表达特征及临床意义;进一步采用胞内免疫荧光标记和流式细胞术检测分析IFN-γ及IL-2在TIM3+T细胞和TIM3-T细胞的表达差异;并应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测患者及正常对照组外周血血浆中可溶性PD-1、TIM3及相关配体PD-L1、Gal-9的表达特征。结果:（1）初诊FLT3-ITD+AML患者及wt FLT3 AML患者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞占淋巴细胞比例均较正常对照组显著下降（P=0.02,P=0.048;P=0.001,P=0.008）;初诊FLT3-ITD+AML患者及wt FLT3 AML患者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞表面TIM3表达水平均较正常对照组显著增高（P=0.001,P=0.008;P=0.032,P=0.001）;初诊FLT3-ITD+AML患者外周血CD4+T细胞上TIM3表达较wt FLT3 AML显著增高（P=0.002）;初诊FLT3-ITD+AML患者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞上PD-1的表达水平均较正常对照组显著增高（P=0.04,P=0.004）;初诊wt FLT3 AML患者外周血CD8+T细胞上PD-1表达较正常对照组显著增高（P=0.023）。（2）初诊AML患者外周血TIM3+CD4+T及TIM3+CD8+T细胞IFN-γ及IL-2分泌水平较TIM3-CD4+T及TIM3-CD8+T细胞显著下降（P<0.0001;P<0.0001）。（3）化疗后达到CR的FLT3-ITD+AML患者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞占淋巴细胞比例较初诊及复发难治FLT3-ITD+AML患者均明显增高（P=0.007,P=0.007;P=0.003;P=0.043）;化疗后达到CR的FLT3-ITD+AML患者CD4+T细胞、CD8+T细胞表面TIM3、PD-1表达水平均较初诊FLT3-ITD+AML患者明显减低（P=0.007,P=0.018;P=0.044,P=0.001）,较复发难治FLT3-ITD+AML患者亦明显减低（P=0.001,P=0.001;P=0.002,P=0.001）。（4）初诊FLT3-ITD+AML患者血浆中TIM3、PD-1表达较健康志愿者明显增加（P=0.001,P=0.003）,化疗后获得CR的患者血浆中TIM3、PD-1浓度较初诊及复发难治FLT3-ITD+AML患者均明显降低（P=0.001,P=0.003;P=0.002,P=0.002）。（5）初诊FLT3-ITD+AML患者血浆中Gal-9、PD-L1表达较健康志愿者明显增加（P=0.001,P=0.031）,化疗后获得CR的患者血浆中Gal-9、PD-L1浓度较初诊及复发难治FLT3-ITD+AML患者均明显降低（P<0.001,P=0.046;P=0.007,P=0.001）。结论:通过动态分析FLT3-ITD+AML患者化疗前后T细胞的比例以及TIM3、PD-1的表达水平提示:在AML的发病机制中负性共刺激分子PD-1、TIM3发挥着重要作用,即PD-1/PD-L1、TIM3/Gal-9可通过诱导T细胞功能耗竭,抑制T细胞免疫应答,介导白血病细胞免疫逃逸,从而参与AML的发生发展,因此可作为预测FLT3-ITD+AML预后的重要因素和潜在的治疗靶点。为改善该群高危患者的预后提供新的策略。