【摘 要】
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该研究拟利用人牙胚体外器官培养模型观察氟对凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响,探讨牙齿发育过程中氟对细胞凋亡产生的作用,为氟牙症发病机制的研究提供新的思路及分子生物
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该研究拟利用人牙胚体外器官培养模型观察氟对凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响,探讨牙齿发育过程中氟对细胞凋亡产生的作用,为氟牙症发病机制的研究提供新的思路及分子生物学依据.该研究采用Trowell型支架培养模型,BGJb培养液中添加适量抗坏血酸,常规培养条件下,培养胎齿14周的人乳牙牙胚.结果显示,采用该实验方法和培养条件,可以将14周胎龄人乳牙牙胚在体外培养12天,并可观察到釉细胞和成牙本质细胞的分化过程,成功地建立了人牙胚体外器官培养类型.并通过以上模型,采用免疫组织化学技术和图像采集与分析系统,研究低浓度(10mg/L)和高浓度(25mg/L)氟对前成釉细胞及分泌期成釉细胞Bcl-2和Bax蛋白表达的影响,探讨牙齿发育过程中氟对细胞凋亡产生的作用.研究表明,氟对人前成釉细胞中的Bcl-2和Bax蛋白的表达具有抑制作用,提示氟对成釉细胞的毒性作用是通过抑制Bcl-2表达而诱导细胞凋亡,从而影响釉质发育的调控机制,最终导致牙齿发育的异常.同时发现,10ml/L及25mg/L 的氟均抑制了Bcl-2和Bax蛋白的表达,即对釉细胞产生了毒性作用.加10mg/L氟培养人牙胚4天后,成釉细胞中Bcl-s和Bax蛋白表达即有下调.因此推断,在人牙胚体外培养中,氟产生毒性作用的最小剂量应低于10mg/L.该实验还证实从釉质分泌前期至分泌期早期氟对釉细胞产生毒性作用,说明氟对釉质发育的影响在分泌前期就已经存在了.
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