高糖环境对豚鼠膀胱Cajal样细胞形态、超微结构的影响

来源 :石河子大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:bashi0000
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旦的:通过观察高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样间质细胞(interstitial cells of Cajal, ICCs)形态及超微结构的变化,探讨高糖环境对豚鼠膀胱Cajal样间质细胞的影响。方法:酶消化法原代培养豚鼠膀胱Cajal样间质细胞,采用透射电镜观察在不同葡萄糖浓度(5、10、15mmol/L)不同时间段(24、72h)体外培养的ICCs样细胞的超微结构:采用激光共聚焦显微镜成像技术测量Fluo-4AM负载后的Cajal样间质细胞长度并记录其胞内钙离子荧光强度的变化。结果:透射电镜观察到随糖浓度增高和培养时间延长,ICCs样细胞内细胞器明显减少,线粒体大小不等,数量减少,肿胀、空泡样改变甚至溶解,内质网扩张、空泡样变,胞质广泛溶解,突起消失;电镜下还观察到部分膀胱Cajal样细胞间具有细胞间桥样结构;高浓度长时间培养下的Cajal样细胞染色后出现染色深浅不同的两类细胞,染色浅的细胞中出现微丝素成份,而染色深的细胞则出现了细胞液化坏死。运用激光共聚焦显微镜成像技术连续扫描和测量Cajal样细胞长度,见体外原代培养的膀胱Cajal样间质细胞随糖浓度增高,ICCs样细胞内钙离子荧光值5mmol/L/24h组和5mmol/L/72h组并无明显差别;与5mmol/L/24h组相比,10mmol/L/24h组是升高的,而15mmol/L/24h组则降低;10mmol/L72h组和15mmol/L/72h组都是升高的,但15mmol/L/72h组较10mmol/L/72h组低,开始出现下降趋势。ICCs样细胞长度:5mmol/L/24h组和5mmol/L/72h组并无明显差别;24h组随糖浓度增高,10mmol/L组和15mmol/L组ICCs样细胞长度逐渐缩短;72h组随糖浓度增高10mmol/L/72h组细胞长度增长,而15mmol/L/72h组细胞缩短。结论:高糖环境可对豚鼠膀胱Cajal样间质细胞造成形态学和超微结构的破坏,导致细胞钙离子内流发生异常,造成Cajal样间质细胞起搏功能减退或消失,这可能是DCP发病的重要原因之一。
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