本文研究了PKCγ在异氟烷预处理抗大鼠局灶脑缺血再灌注损伤中的作用,主要从以下两部分展开: 第一部分： 目的:探讨异氟烷预处理对局灶脑缺血再灌注损伤的保护作用以及额叶皮层蛋白激酶Cγ亚型(Portein Kinase C-gamma，PKCγ)分布的变化。 方法:雄性SD大鼠24只，随机分为假手术组、缺血再灌注组、异氟烷预处理组，每组8只。采用大脑中动脉线拴法阻断前脑血供2小时、再灌注24小时制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。缺血再灌注组大鼠用水合氯醛麻醉，取颈正中切口，暴露右侧颈总动脉、颈外动脉及颈内动脉，结扎颈总动脉、颈外动脉，于颈总动脉分叉下方切一切口，将以末端用酒精灯烧成圆头的呢绒线(3-0)置入颈内动脉17-18mm，结扎颈内动脉。缺血2h后直接将置入的昵绒线拔出，即为再灌注。假手术组分离血管，插线距离少于9 mm，其余步骤同缺血再灌注组。异氟烷预处理组于缺血前1.5小时经半密闭的吸入箱吸入异氟烷(呼气末浓度维持1.5％)，持续1小时，待动物清醒后按上述方法制备缺血再灌注模型。所有大鼠再灌注24小时后用Zea Longa评分法进行神经功能缺陷评分。大鼠处死后取脑用TTC染色法测脑梗死体积；用免疫荧光方法观察和测定额叶大脑皮层PKCγ的分布与表达。 结果:1)与假手术组比较，缺血再灌注组和异氟烷预处理组神经功能缺陷评分、脑梗死体积增加；缺血再灌注组额叶大脑皮层PKC7表达减少，而异氟烷预处理组额叶大脑皮层PKC7表达增加，且主要分布于细胞膜。2)与缺血再灌注组比较，异氟烷预处理组神经功能缺陷评分、．梗死体积显著减少，而额叶大脑皮层PKCγ表达则明显增多。 结论:异氟烷预处理对大鼠局灶脑缺血再灌注损伤具有保护作用，这种作用可能与额叶大脑皮层PKCγ分布/表达的变化/增加有关。 第二部分： 目的:探讨异氟烷预处理抗脑缺血再灌注损伤过程中PKCγ在细胞膜和细胞浆内转位随时间变化的规律。 方法:实验用雄性SD大鼠72只，分为假手术组、缺血再灌注组、异氟烷预处理组三大组，再按再灌注后的不同时间点又各分成再灌注4、24、72小时三个亚组，共计9个组(n=8)。采用大脑中动脉线拴法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。缺血再灌注组大鼠前脑缺血2小时后，分别在再灌注4、24、72小时时，处死大鼠，取额叶皮层，用免疫印迹方法测定神经细胞膜上和胞浆内PKCγ的含量。假手术组只分离血管，不阻断血管，取样点和方法同缺血再灌注组。异氟烷预处理组于缺血前1.5小时经半密闭的吸入箱吸入异氟烷(呼气末浓度维持1.5％)，持续1小时，30分钟后制备脑缺血再灌注模型，其余同缺血再灌注组。 结果:与假手术组比较，缺血再灌注组和异氟醚预处理组在再灌注4、24和72小时后，PKCγ在细胞膜上的分布均有所增加，而在细胞浆中的分布均降低，差异均有显著性。但是在缺血再灌注组，这些变化在再灌注后各时间点之间的比较无显著性差异。而异氟醚预处理组PKC在细胞膜上或在细胞浆中的分布在再灌注后各时间点上又分别比缺血再灌注组显著升高或降低，其中再灌注24小时后这种变化达到峰值。 结论:异氟烷预处理增加PKCγ向细胞膜转位，再灌注后24小时达到高峰。