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研究背景糖尿病患者伴随血管内皮受损,表现为内皮细胞衰老与血管内皮依赖性舒张功能减弱。糖尿病时血管内皮受损的机制尚未完全明了。糖尿病时存在着氧化和抗氧化机制的紊乱,导致活性氧（ROS）增多。ROS除了灭活一氧化氮（NO）外,还参与炎症反应,促进细胞损伤。ROS的生成受多种酶类催化,其中H2O2经髓氧化物酶（MPO）催化生成毒性更大的HOCl,HOCl除了可直接损伤细胞外,还参与炎症反应。新近发现,内皮等细胞存在一种具有MPO相同功能的过氧化物酶,能催化H2O2生成HOCl,称为血管过氧化物酶（VPO）。本实验在2型糖尿病大鼠观察VPO与血管内皮细胞损伤的关系,然后在培养内皮细胞,运用基因沉默技术进一步证实VPO在促进细胞损伤中的重要作用。方法动物实验:实验分设两组:正常对照组,给予普通饲料;糖尿病动物组,高脂饲料饲养4周,单次腹腔注射STZ（35mg/kg）,继续高脂饲养8周。实验结束时,获取血浆测定TNF-α与MCP-1的浓度（ELISA法）,并取胸主动脉检测血管内皮依赖性舒张反应及血管组织中VPO mRNA水平（实时定量PCR法）。细胞实验:培养人脐静脉内皮细胞株,不同浓度高糖（10、20、30mM）处理,以蔗糖为对照。检测细胞活性、β-半乳糖苷酶染色（反映衰老）、TNF-α与MCP-1水平（ELISA法）与VPO mRNA与蛋白表达。在此基础上,观察VPO干扰对高糖所致细胞损伤的影响。结果与正常对照组比较,模型组大鼠血糖、血脂及胰岛素抵抗指数明显升高。糖尿病大鼠胸主动脉内皮依赖性舒张反应明显降低,血浆中TNF-α和MCP-1的浓度显著增加,同时血管组织VPO mRNA表达水平显著增高。与正常对照组比较,高糖孵育48 hβ-半乳糖苷酶染色阳性的内皮细胞显著增加,培养液中TNF-α和MCP-1水平增高,并能浓度依赖性地上调VPO mRNA及蛋白的表达。VPO shRNA干扰能显著抑制高糖所致β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数增加,以及TNF-α和MCP-1水平升高。结论2型糖尿病血管受损与VPO生成增加有关,VPO通过诱导氧化应激和炎症反应从而降低内皮细胞NO的生物利用与促细胞衰老。