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背景与目的:
舌癌耐药相关基因（TCRP1）是本课题组从舌癌多药耐药细胞系Tca8113/PYM自主克隆的新基因。前期的体内外实验发现TCRP1基因受控于转录因子c-MYC，并经AKT/NF-KB等抗凋亡途径特异性介导舌癌细胞顺铂耐药和放疗耐受;同时TCRP1不仅在舌癌组织中高表达，在肺癌，卵巢癌，乳腺癌等多种组织的表达也高于其相应的正常组织，提示TCRP1基因可能参与多种肿瘤的铂类药物化疗耐受。为证实这一假设，本研究拟检测TCRP1表达与上述肿瘤继发性铂类药物抗性的关系，并在一系列肺癌细胞系中观测TCRP1基因表达与原发性铂类抗癌药物耐受的关系。为明确TCRP1基因特异性介导铂类抗癌药物耐受的标志物作用，开展以TCRP1为靶标的化疗耐受预测和干预提供进一步证据。
方法:
(1)以顺铂耐受的舌癌细胞系(Tca8113/PYM)为阳性对照，顺铂敏感的乳腺癌细胞系(MCF-7/5-FU)为阴性对照，QPCR, WesternBlot和MTS检测卵巢癌细胞（COC1和COC1/DDP）、肺癌细胞(A549和A549/DDP) TCRP1基因的表达与铂类药物（顺铂cDDP和奥沙利铂L-OHP）敏感性的关系。
(2) MTS筛选8种不同类型肺癌细胞系对顺铂的药物敏感性，QPCR和Western Blot检测这些细胞中TCRP1基因的表达，分析TCRP1基因表达与原发性耐药的相关性。
(3) si-RNA干扰以上获得性及先天性耐药株细胞TCRP1和c-MYC基因;Bay11-7082抑制细胞NF-κB活性，MTS和Western Blot检测处理后铂类药物敏感性及其相关信号分子的改变，进一步阐述c-MYC对TCRP1的表达调控及TCRP1介导铂类药物耐药的分子机制。
结果:
(1) TCRP1基因在COC1/DDP，A549/DDP和Tca8113/PYM的表达明显高于各自的亲代细胞，在MCF-7/5-FU中TCRP1的表达与亲代细胞无明显差异;TCRP1高表达细胞株对铂类药物（cDDP和L-OHP）的药物敏感性明显低于低表达细胞。两者存在正相关关系(rcDDp=0.67,rL-OHp=0.83;p＜0.05)。
(2)8种肺癌细胞系中TCRP1基因的表达与顺铂的耐药性呈现正相关(r=0.68; p＜0.05)。其中TCRP1基因表达最高的95D细胞比表达量最低的H1299细胞对cDDP和L-OHP的耐药性分别增加5.5、5.6倍。
(3)干扰获得性耐药株(COC1/DDP，A549/DDP和Tca8113/PYM)及先天性耐药株95D细胞TCRP1，c-MYC，及抑制NF-κB都能一定程度逆转c-MYC正性调控的TCRP1通过AKT/NF-κB/Bcl-2介导的铂类化疗耐受。
结论:
(1) TCRP1基因不仅介导舌癌细胞的化疗耐受，也介导肺癌，卵巢癌等多种肿瘤的化疗耐受;
(2) TCRP1基因不仅介导肿瘤化疗的继发性耐受，也介导其原发性化疗耐受;
(3) TCRP1不仅介导顺铂化疗耐受，也介导奥沙利铂的化疗耐受。