胰岛素是一种重要的医用蛋白类激素,但对于它的分离纯化研究并不多见,因此有效的分离纯化方法显得非常重要。本文首次采用亲和沉淀法分离纯化胰岛素。本文首先成功合成了一种新型pH敏感可逆溶解聚合物PMMDN作为亲和沉淀载体。该聚合物PMMDN是在实验室现有研究的基础上,以甲基丙烯酸,甲基丙烯酸二甲氨基乙酯,甲基丙烯酸甲酯,和N-羟甲基丙烯酰胺为单体,调整它们的比例,以偶氮二异丁氰为引发剂通过无规共聚得到。采用Zeta电位法测得PMMDN等电点为3.51,称重法测得其回收率为96.1%,粘度法得到其粘均分子量为126.3KDa,凝胶渗透色谱法测定重均分子量为4.904×105Da。锌离子作为亲和配基,以环氧氯丙烷为活化剂,亚氨基二乙酸为螯合剂,成功的连接在聚合物上得到用于亲和沉淀的共聚物。在环氧氯丙烷浓度为0.9ml时,可以获得最大配基密度为92.7μmol/g聚合物。在利用亲和共聚物通过亲和沉淀法分离纯化胰岛素过程中,吸附反应的最优条件为0.8mmol/mlNa2SO4,pH为7.5的PBS,并由吸附等温线得到最大吸附量可以达到153.86mg/g共聚物,在2h后吸附达到平衡,且共聚物上配基密度越高,吸附量越大。最优洗脱条件为0.5MCH3COOH,0.8M咪唑和0.9M CH5N3·HCl,最大洗脱率为96.2%。通过HPLC法测定洗脱后的胰岛素活性,其为标准胰岛素的95.2%。通过亲和沉淀法分离纯化胰岛素的共聚物在循环使用5次后,仍然保持高于100mg/g共聚物的吸附量,并且每一次的洗脱率均在95%以上。以上结果表明了亲和沉淀技术应用于胰岛素分离纯化具有可行性。