杂化材料的制备及其在分子检测与细胞活性控制上的应用

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杂化材料,由于其具有多方面属性,应用非常广泛。在生物材料参与下,制备得到无机纳米材料和高分子多孔膜材料,都能较好的应用于生物领域,同时也为研究生物问题,提供了一个全新的化学角度。目前,CdSe量子点制备实验操作相对复杂,且耗时,本文利用生物方法,快速、简易制备得到CdSe量子点杂化材料,可应用于生物检测分析及合成机理探究;高分子多孔膜,主要应用于物理、电子等领域,在制备多孔膜时,引进DNA和PEI生物成分,制备高分子多孔膜杂化材料,可应用于细胞限域内活性控制研究。本论文主要分为三部分:第一部分,生物分子快速、简易合成CdSe量子点。利用BSA、GSH两种生物分子,制备硒纳米粒子SeNPs,并以SeNPs为中间体,制备CdSe量子点杂化材料,通过各种表征确定其结构;探究了影响CdSe量子点杂化材料稳定性的因素;杂化材料应用部分:CdSe量子点杂化材料应用于专一性检测NADPH,线性范围为0-13mM,检测限为250μM,且在实际样品血清干扰下,可检测出NADPH。最后,我们探讨了CdSe量子点杂化材料对大肠杆菌的毒性,结果表明CdSe量子点基本没有任何毒性。第二部分,酵母细胞合成CdSe量子点。我们通过酵母细胞,在细胞体内合成CdSe量子点杂化材料,通过改变酵母细胞代谢途径,确定酵母细胞合成CdSe量子点是由线粒体功能主导的。第三部分,生物分子DNA参与制备高分子多孔膜。利用简单方便的微乳液滴模板法,制备得到孔隙内带正电的多孔膜杂化材料;随后,利用带负电荷GFP质粒DNA与带正电荷的PEI电解质多次层层组装到孔隙内,可实现单细胞阵列化;通过FDA测试表明,多孔膜内细胞依然保持活性;我们再培养多孔膜内细胞,细胞可生长到与孔隙尺寸匹配,且不再继续增殖,表明,细胞增殖行为受到控制;通过NaCl控制释放,再引入单链DNA后,可实现酵母细胞在多孔膜内的原位转染,通过半乳糖为糖源的YPD诱导,酵母细胞表达绿色荧光蛋白,通过共聚焦倒置荧光显微镜表征;最后,我们探讨了转染效率与孔内层层组装的DNA与PEI的关系。
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