菌核净的免疫检测技术研究

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wljb1213
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
菌核净(Dimethachlon)是一种亚胺类新型高效低毒杀菌剂,对于油菜菌核病、烟草赤腥病、水稻纹枯病等具有良好的防效作用,目前尚缺乏灵敏、快速、经济的残留检测方法。免疫学检测技术是对农药及其代谢物的重要的快速分析方法,灵敏度高,特异性强。本论文利用菌核净多克隆抗体进行了免疫学检测技术研究,主要研究结果如下:1.对菌核净的结构进行修饰,通过三步反应在菌核净分子上引入-CO(CH23COOH活性基团,设计合成了模拟菌核净特征结构的半抗原菌核净-2-戊二酸半酯;利用活性酯法(DCC法)对半抗原与载体蛋白进行偶联,通过紫外扫描法和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳证明成功合成了人工抗原。2.以菌核净半抗原与牛血清蛋白(BSA)的偶联物作为免疫原免疫新西兰大白兔,获得了抗菌核净的多克隆抗体。制备的抗血清效价达1:512000,经方阵滴定法和间接非竞争ELISA法确定了包被原和抗血清的工作浓度:包被原稀释度为1:1000(2μg╱mL),血清稀释度为1:128000.3.建立了菌核净间接竞争ELISA(IC-ELISA)检测方法,优化了检测条件。对菌核净的半数抑制浓度(I50)为2.83μg/mL,最低检测浓度(I10)为0.011μg/mL,线性检测范围为0.044-25.00μg/mL。抗体对甲醇有一定耐受力,待测样品中甲醇含量不宜超过10%;磷酸盐缓冲液在近中性条件下,ELISA有较高的检测灵敏度。对烟叶中的菌核净进行添加回收试验,IC-ELISA检测的样品回收率为65.58%-80.88%,变异系数为6.35%-8.73%;HPLC检测的样品回收率为64.19%-73.05%,变异系数为2.61%-5.23%;两种方法分析结果具有较好的相关性(R2=0.9965,y=0.8934x+1.2089)。建立的菌核净免疫检测技术可以适用于对菌核净残留的快速筛选检测。
其他文献
<正>http://www.brandingstrategyinsider.com每个品牌故事的中心都应该聚焦于一个英雄角色。这个"英雄"可以是一个创意、一个人或是一件事,它们是构成品牌故事影响力的要素,
古地图对于研究一个国家历史上的自然地理、行政区划、人口分布、经济发展以及疆域变迁等具有至关重要的意义。以18世纪俄国驻北京传教士罗索欣(И.К.Россохин, 171
本文建立了基于GC/FID/MS的烟叶化学组成研究方法和GC/μECD/MS-SIM的烟叶中有机氯农药残留的分析方法。优化了超声波辅助液—液萃取、加速溶剂萃取的操作条件,结果表明:超声
研究背景与目的:结核病是由结核分枝杆菌( Mycobacterium tuberculosis M. TB)感染引起的慢性传染病。近年来由于环境污染的日益加重、糖尿病等发病率的上升以及AIDS的流行,
散叶烤房是巴西苏萨·克鲁兹(SOUZAGRUZ)公司于20世纪90年代后期研究出来的密集烤房的一种新型概念产品。该烤房被苏萨·克鲁兹公司命名LOOSE-LEAF BARN,翻译过来即为散-1-叶
丁克家庭是我国经历转型时期的家庭结构变革的一种正常现象,作为社会变迁的一种显著的表现形式,它的出现表明社会正在经历着急剧的变革。应该正确地对待与引导,以求丁克家庭
保暖是人类服装的一个很重要的功能,保暖材料也因此各种各样,天然纤维具有优良的保暖性但又各有不足,人们想到了开发有空腔的中空涤纶纤维,兼具天然纤维的保暖性和涤纶的易洗
服装CAD系统自二维向三维转变,是三维计算机技术成熟与服装个性化定制的一个必然趋势与结果。在整个服装CAD系统中,服装的初始生成、服装变形、服装碰撞检测是服装设计的关键技
<正>我国著名中西医结合眼科专家、国医大师唐由之,在前人研究的基础上,研究金针拨障术,创造性地将白内障针拨术的切口定位于距角膜缘外的颞下方4mm处。在此基础上,进行变革,
会议
现在世界上几乎95%的卷烟都使用醋酸纤维作过滤嘴,随着人们对健康的日益重视以及反烟大背景下,开发新型实用的烟用滤材,有重要意义。纤维素是自然界最丰富的天然高分子,在纤