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近年来,以表皮生长因子受体(EGFR)为作用靶点的肿瘤显像和治疗成为了研究的热点方向。单克隆抗体LA22是一个优良的抗EGFR单抗,一直在各项研究中用于评价EGFR。为了开发LA22在肿瘤放射免疫治疗方面的应用,本研究通过两种不同的双功能螫合剂偶联,制备了两种的LA22的177Lu标记物,对其分别进行体内外的一系列评价并对实验结果进行比较,以选择合适的放射性标记抗体用于肿瘤放免治疗的研究。在本研究中,使用DOTA-NHS、CHX-A”-DTPA分别作为177Lu标记LA22的双功能螯合剂,成功完成DOTA-NHS、CHX-A”-DTPA与LA22的偶联,制备出标记物177Lu-CHX-A”-DTPA-LA22及177Lu-DOTA-LA22。两种标记物的标记率在55~70%之间,经过PD-10柱纯化以后放化纯>98%。两种标记物在生理盐水、EDTA溶液、血清中均有较好的稳定性,放置72小时后放化纯仍然保持90%以上。使用125I标记LA22,进行LA22、CHX-A”-DTPA-LA22、DOTA-LA22的细胞(A549人肺癌细胞)结合竞争实验,评价偶联对抗体免疫活性的影响。通过Lindmo方法,评价标记物的放射免疫活性。细胞结合竞争实验表明,制备的两种偶联物与原始的LA22抗体的免疫活性差别不大,其IC50值分别为0.2850 nM(LA22),0.3762 nM(DOTA-LA22),0.3416 nM(CHX-A”-DTPA-LA22);Lindmo实验结果表明,两种标记物的放射免疫活性分数均保留了67%左右。此外,以正常小白鼠为实验对象,研究177Lu-CHX-A”-DTPA-LA22和177Lu-DOTA-LA22在血、肝、肾中的代谢稳定性,并研究两种标记物在白鼠血液中的药代动力学。研究发现,两种标记物在体内血、肝、肾中均有着良好的代谢稳定性,注射后24小时没有出现明显的标记物分解、核素脱落。血清除符合二室模型,177Lu-CHX-A”-DTPA-LA22的T1/2α为2.2小时、T1/2β为64.6小时,177Lu-DOTA-LA22的T1/2α为1.4小时、T1/2β为36.2小时。最后,以荷瘤BALB/c裸鼠为实验对象,对两种标记物分别进行生物分布研究并做相应比较。荷瘤裸鼠生物分布数据表明,177Lu-DOTA-LA22在肿瘤中的摄取明显优于177Lu-CHX-A”-DTPA-LA22(注射3天后,%ID/g为32.24±4.76VS13.70±1.28,p=0.020);而在其他正常组织中,两者摄取无显著性差别。研究结果表明,以DOTA-NHS为双功能螫合剂制备的标记物177Lu-DOTA-LA22有着良好的体内外稳定性和肿瘤靶向性,可对其进一步研究和开发以用于肿瘤放射免疫治疗。