维生素B12广泛应用于医药和食品工业，主要由微生物发酵得到。本论文从应用角度出发，对维生素B12发酵生产过程中检测、提取方法进行了初步研究，期望为维生素B12发酵工艺改进提供参考借鉴。本论文主要进行了以下几个方面研究： 1.HPLC直接检测发酵液中维生素B12含量羟基钴胺素、脱氧腺苷钴胺素、甲基钴胺素是发酵产生维生素B12的有效形式。避光条件下，费氏丙酸杆菌菌体经细胞破碎后，使用高效液相色谱分析其中维生素B12各有效成分含量。该检测方法重复性好、分析速度快，可应用于工业发酵生产维生素B12的过程监控和检测，本方法在指导维生素B12产生菌的定向选育方面亦有一定应用价值。 2.维生素B12光稳定性研究及快速检测方法的建立脱氧腺苷钴胺素和甲基钴胺素对光线十分敏感，光照处理后会完全转化为羟基钴胺素。羟基钴胺素和氰基钴胺素对光线相对稳定。考察了不同光源对脱氧腺苷钴胺素和甲基钴胺素光解转化影响，发现其光解速率与光照强度成正比。 费氏丙酸杆菌细胞破碎液经光照处理，发酵产生的维生素B12各组分迅速转化为单一、稳定的羟基钴胺素。使用HPLC检测光解处理后的细胞破碎液，通过光解转化的羟基钴胺素含量反映维生素B12总含量。此测定方法准确、快速，操作过程不需严格避光，更具工业应用推广性。 3.费氏丙酸杆菌细胞破碎提取维生素B12考察超声波法、煮沸法、微波加热法、高压均质法破碎费氏丙酸杆菌动力学过程，比较不同方法提取维生素B12效率。使用煮沸法和微波加热法提取率最高，并且处理过程中可有效去除蛋白质。煮沸法提取维生素B12处理量大，操作简便，适用于工业生产。微波加热法提取维生素B12所需设备简单，处理时间短，可用于HPLC检测过程中样品预处理。4.大孔树脂吸附法提取纯化发酵液中维生素B12费氏丙酸杆菌细胞破碎液经光解处理后，发酵产生的维生素B12完全转化为羟基钴胺索形式。比较了4种大孔吸附树脂对羟基钴胺素的静态吸附、解吸性能，考察了温度和pH对树脂的吸附和解吸性能影响。结果表明CAD45树脂对于羟基钴胺素具有良好的吸附能力，并且使用乙醇溶液可达到良好的解吸效果。CAD45树脂使用湿法装柱，研究树脂对羟基钴胺素的动态吸附和洗脱过程。初步确立了使用大孔吸附树脂提取纯化发酵液中羟基钴胺素的实验方案。