前言 卵巢上皮类癌占卵巢恶性肿瘤的85％-90％，也是致死率最高的恶性肿瘤。虽然卵巢上皮类癌发生的确切机制目前还不清楚，但公认环境因素是卵巢癌发病因素之一。大量研究表明DNA氧化性损伤与肿瘤的发生关系密切。8-羟基-2′脱氧鸟嘌呤核苷(8-hydroxy-2′-deoxyguanosine，8-OHdG)是DNA氧化损伤最主要的类型。8-OHdG可作为一种生物检测标记来研究探讨DNA氧化损伤导致肿瘤发生的机制。 本试验的目的是通过检测卵巢上皮类肿瘤患者尿中8-OHdG的含量，探讨DNA氧化损伤在卵巢上皮类癌发生机制中的作用。 实验材料与方法 一、研究对象 2002年3月～10月中国医科大学附属第一医院、二院妇科手术并经病理确诊为卵巢上皮类癌患者21例。临床分期、病理分级采用国际妇产科学会(FIGO)制定的标准，选取同期手术的良性卵巢上皮类肿瘤患者17例。同时选取健康妇女31例作正常对照。 二、样品收集 取受试对象的即时尿2ml，不加任何防腐剂，-20℃冰箱保存，待测8-OHdG含量。为避免影响检测效果，术前取样均未经任何治疗。 三、实验方法 将所有收集尿样解冻，12，000g／min离心5 min，取上清100ul检测，用酶联免疫法0LISA）检测8－OHdG，实验所用试剂盒由日本老化制御研究所提供。每板做一套浓度范围为0．5－200ng／Inl的标准曲线，每份样本作两个平行样。由于尿中的8－OHdG浓度受尿液浓缩的影响，本实验所测8－OHdG水平均用苦味酸法检测尿肌配值进行校正，即 x t So ＂g／mgCr。 四、统计方法 应用SPSS10．0软件，采用t检验、方差分析进行统计分析。 实 验 结 果 1．卵巢上皮类良性、恶性肿瘤组及健康女性组尿8－OHdG含量的检测结果 门）健康女性组与卵巢上皮类良性肿瘤组患者的尿8－0＊dG的含量无显著性差异（P＞O．05）。 p）上皮类卵巢癌患者尿8－OHdG的含量明显高于健康对照组，其差异有显著性意义河＜O．05八 门）卵巢上皮类良、恶性肿瘤之间差异有显著性意义（P＜o．05地上皮类卵巢癌患者尿8－OHdG的含量明显高于卵巢上皮类良性肿瘤组。 2．卵巢上皮类恶性肿瘤患者按组织学类型分为粘液性囊腺癌、浆液性囊腺癌；按临床分期分为二期、11期、见期、IV期；按分化程度分为GI级、GZ级、G3级。 门）卵巢上皮类恶性肿瘤患者的尿8－OHdG含量按组织学类型进行比较：粘液性囊腺癌与浆液性囊腺癌患者的尿8－OHdG含量无显著性差异瞩＞O．05人 p）卵巢上皮类恶性肿瘤的患者的尿8－OHdG含量按临床分期进行比较：I期以下（包括1、H期）患者与皿期以上（包括皿＊期）患者的尿8－0枷G含量无显著性差异（P＞o．贿人 ·2· p）卵巢上皮类恶性肿瘤的患者的尿8－OHdG含量按分化 程度进行比较：GZ级以下（包括GI、GZ级）患者与G3级患者的尿 8－0＊dG含量之间无显著性差异K＞0．05人 讨 论 暴露于外环境氧化剂和内源性代谢过程中形成的活性氧群 （ROS）在癌发生机制和变性疾病中起很重要的作用。ROS，如羟 自由基＼单线态氧、光动力学效应可导致基因毒性损害，包括单链 和双链断裂，DNA一蛋白质交联。1984年Kasai和Nishimura首次 报道了在体外实验中，鸟瞟吟碱基的C－8位羟化形成8一羟基一 2’脱氧鸟膘吟核着u－OHdG）是所有DNA氧化损伤产物的主要 形式。近年来，机体8－OHdG水平已被广泛接受为DNA氧化损 伤的生物标志物，并可用来估计氧化应激相关癌症发生的危险性。 正常生理过程中，机体产生的自由基也能使DNA碱基受到氧 化形成8－OHdG，它可被体内的修复系统修复，从DNA链上被切 除，人血汇集到尿中，不需要进一步代谢，因此正常机体组织，血 液，尿中也存在 8－OHdG。本研究中健a照组与中国以往报道 的健康女性的尿8－OHdG水平相近，各年龄组之间没有发现显著 性差异，这与日本的人群研究和中国以往报道结果相一致。 国外有学者报道，当ROS尤其是羟自由基攻击DNA时，产生 大量 s－ona民同时与 s－onac修复有关的特定裂解酶和 HOGGI等酶的活性代偿增强，释放到尿中的修复产物8－OHdG 增多，这可能是癌症患者尿中8－OHdG含量升高的原因。DNA 受到过量 ROS攻击时，残留累积在 DNA链上 8－OHdG也大量增 多，在DNA复制过程中，DNA链上的8－OHdG可以与胞噙陵以 外的其它碱基配对形成点突变，其中GC－－＋TA突变的发生已为大 量体内体外研究所证实。人类肺癌和肝癌细胞中分离的p53基因 ·3·中已检测到 8－OHdG诱导的 GC—TA的颠换。已有研究表明DNA序列改变能激活原癌基因K－ras和C－Raf－l，使抑癌基因p53缺失或失