Nesfatin-1,是一种核组蛋白NUCB2派生前体的神经肽,结构上由82个氨基酸构成。NUCB2,作为nesfatin-1的前体,在结构上由含24个氨基酸的信号肽和含396个氨基酸的蛋白构成,这些氨基酸序列在不同物种间高度保守(大鼠87.4%与人同源,95.7%与小鼠同源)。NUCB2在激素转化酶(prohormone convertases,PCs)作用下在特定位点裂解产生三个片段nesfatin-1(l-82aa)、nesfatin-2(85-163aa)、nesfatin-3(166-396aa)。其中nesfatin-1在摄食与能量调节上发挥重要作用。本实验以犬为研究对象,探讨Nesfatin-1在犬消化系统上的分布与表达。通过探究Nesfatin-1在消化系统不同部位的表达特点,在一定程度上丰富Nesfatin-1调节哺乳动物摄食及消化的研究内容。从市场购买不同发育阶段健康中华田园犬,分成四组:幼年期(平均年龄1.5M)3只,初情期前平均年龄4.5M)3只,初情期(7M)3只,成年期(10M)3只。分别取其消化道组织,主要包括食管、胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠、肝脏和胰腺,一部分组织保存在4%多聚甲醛溶液中固定,石蜡切片染色后在光学显微镜下拍照,并采用免疫组化法检测Nesfatin-1的分布。另一部分组织样品则保存在-80°C冰箱,采用荧光定量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)测定NUCB2 mRNA的表达。结果表明:Nesfatin-1/NUCB2蛋白主要分布于胃组织的胃底腺上,且细胞形态较不规则(椭圆形、锥状、三角状等),与内分泌细胞相似;nesfatin-1/NUCB2蛋白还分布于胰腺组织的胰岛区域特别是胰外分泌部上,且均为强阳性。而nesfatin-1/NUCB2蛋白在其它消化组织上均未见表达。NUCB2 mRNA无论是在幼儿期、初情期前、初情期还是成年期的食管、胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠和肝脏中含量均无明显差异(P>0.05),而胰腺组织中NUCB2 mRNA含量显著高于其他组织(P<0.05)。而同一发育阶段消化组织上NUCB2 mRNA的表达发现在胰腺组织上表达量最高,其次是胃组织,而其他组织表达量均较低(P<0.05)。而在肠道组织中,初情期前NUCB2 mRNA的含量明显高于初情期犬(P<0.05)。结论:Nesfatin-1/NUCB2蛋白主要分布于犬的胃组织的胃底腺、胰岛以及胰腺外分泌部;NUCB2 mRNA表达于不同发育阶段犬的消化器官上,其中在胃和胰腺组织上的表达水平较其他组织高;NUCB2 mRNA的水平从初情期前至初情期呈下降的趋势。