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龙胆为一种多年生草本植物,属于龙胆科,具有的药用价值有着悠久的历史。多糖是龙胆的有效成分。本文将龙胆根作为原材料,对龙胆多糖进行提取纯化、初步结构表征、理化性质及体外抗凝血活性研究。主要研究内容与实验结果如下：1.采用热水浸提法提取龙胆粗多糖,在单因素实验基础上,经响应面优化得到最佳提取条件如下：浸提温度99.7℃,浸提时间160min,液料比25 mL/g,在上述条件下多糖的得率达到18.48%。2.以蛋白质去除率、多糖保留率为指标,考察了NaCl、CaCl2、 TCA(三氯乙酸)以及聚酰胺吸附法对龙胆粗多糖脱蛋白的影响。结果显示：这四种方法的蛋白质去除率分别为63.4%、92.4%、80.6%、73.6%；多糖保留率分别为65.0%、62.9%、64.3%、90.4%。并确定聚酰胺法为最佳的去蛋白方法,经紫外光谱检测证明其方法能够较好地脱除龙胆粗多糖中的蛋白质。3.以脱色率、多糖保留率为指标,考察了过氧化氢法、AB-8大孔吸附树脂法和活性炭法对龙胆粗多糖脱色的影响。结果显示：这三种方法的脱色率分别为59.5%、63.9%、61.1%；多糖保留率分别为59.3%、68.2%、62.9%。并确定AB-8大孔树脂为最佳的脱色方法,且有脱蛋白效果。4.龙胆粗多糖经过脱蛋白、脱色得到龙胆多糖(GSP),对其进行阴离子交换层析柱分离,得到3个多糖组分将其命名为GSP-1、GSP-2、GSP-3,其回收率分别为5%、35%和23%。在这三个组分中,GSP-1为中性多糖,是用蒸馏水从阴离子交换层析柱上洗脱获得的；另外两种是洗脱获得的酸性多糖,其洗脱剂分别是0.1 M和0.2 MNaCl。基于回收率和纯度鉴定,对GSP-2进行琼脂糖凝胶柱层析,收集主要组分。5.通过紫外、红外、高效凝胶渗透色谱(HPGPC)和高效阴离子液相色谱配脉冲安培检沏(HPAEC-PAD)方法表征了龙胆多糖及其组分的初步结构。紫外扫描结果表明GSP-1,GSP-2以及GSP-3于280或260 nm处没有观察到吸收峰,暗示其不含蛋白质与核酸。傅里叶变换红外光谱显示龙胆多糖及其组分都具有相似的图谱,为多糖类化合物。HPGPC法测定GSP-2和GSP-3的重均分子量分别为28849 Da和58203 Da。HPAEC-PAD分析表明阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、半乳糖醛酸与鼠李糖是GSP、GSP-1以及GSP-2主要含有的单糖。GSP-3由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖以及半乳糖醛酸组成,其摩尔百分含量相应的为9.0%,40.6%,39.2%以及11.1%。6.以活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)以及凝血酶原时间(PT)为指标,探讨了龙胆多糖及其组分的体外抗凝血活性。其结果表明与生理盐水相比,GSP,GSP-1,GSP-2以及GSP-3能够延长APTT和TT,但对PT没有影响。而且,当GSP,GSP-1,GSP-2和GSP-3的浓度达到1.5 mg/mL时,其对APTT和TT的影响达到显著性水平(P<0.01或P<0.05)。在APTT实验中,浓度为1.5mg/mL的GSP-3比生理盐水延长了1.3倍。在TT实验中,浓度为1.5mg/mL的GSP-3比生理盐水延长了1.1倍。因此GSP-3表现出有效的抗凝血活性,有望用于临床及食品工业中。本研究的创新点：1.两种纯化多糖组分GSP-2以及GSP-3经HPGPC法得到了其重均分子量：2.首次对分离纯化的龙胆多糖组分进行抗凝血活性的研究。