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青藏高原环境条件极端,具体表现为强紫外、低氧等,但在此极端条件下的发酵牦牛奶中确蕴藏着丰富的乳酸菌资源。本试验材料来源于2012年和2013年在青藏高原祁连青东高山盆地针叶林、草原区,羌塘高原湖盆高寒草原区、果洛那曲高原山地高寒灌丛草甸区,藏南高山谷地灌丛草原区和藏东高山深谷针叶林区等5个生态地理区采集的牦牛酸奶样品,共55个地区,241份牦牛酸奶样品中分离的乳酸菌。试验将2012年和2013年牦牛酸奶样品中分离的乳酸菌进行纯化、16S rRNA基因序列测定,共鉴定乳酸菌1912株,建立了青藏高原发酵牦牛乳最大的乳酸菌种质资源库之一,并对青藏高原发酵牦牛乳中乳酸菌的多样性及其抗氧化性能进行了研究。本试验利用16S rRNA基因序列测定共鉴定乳酸菌1912株,隶属于7个属,28个种或亚种。其中乳杆菌属（Lactobacillus）有1017株,占所分离菌株的53.19%;片球菌属（Pediococcus）为617株,占比32.27%;肠球菌属（Enterococcus）和明串珠菌属（Leuconostoc）分别为244和27株,占比12.76%和1.41%;链球菌属（Streptococcus）3株,只占所分离菌株的0.16%。28个种或亚种中,乳杆菌属乳酸菌主要有植物乳杆菌（L.plantarum,）、德氏乳杆菌（L.delbrueckii）和罗伊氏乳杆菌（L.reuteri）;其中罗伊氏乳杆菌是首次从传统发酵食品中分离得到。青藏高原传统发酵牦牛酸奶中乳酸片球菌（lactococcus lactis）为优势种,有606株,占所有鉴定菌株的31.69%。对青藏高原发酵牦牛乳乳酸菌种质资源库的1201菌进行H2O2初筛,筛选出培养基中起始H2O2浓度为1.9 mmol/L时菌株生长8h后OD值仍在1.00以上的菌株21株进行复筛。21株乳酸菌的发酵上清液对DPPH的清除率都达到83%以上。利用21株乳酸菌的发酵上清液对DPPH的清除率和还原能力,菌株发酵上清液、菌体细胞和无细胞提取物对OH自由基的清除力O2-自由基的清除率,以菌株发酵上清液的总抗氧化能力和T-SOD活性,筛选出10株综合清除能力较强的具高抗氧化特性的乳酸菌As21、Bs44、Fm15、As39、Bs48、D57、D61、Bs29、As13、D28。体外益生试验中,10株菌在pH为3的MRS培养基中生长3 h后存活率达到了94%以上;疏水性最高的菌株为D57,到达51.12%;菌株As21的迟滞期只有2.85 h;10株乳酸菌在pH 3.0的人工胃液消化3 h然后转入人工肠液消化24 h后,菌株As21的存活率最高,为64.28±0.09%,菌株Bs44的存活率也可达到57.49±0.08%。综合筛选出两株具有优良体外益生特性的高抗氧化活性乳酸菌菌株戊糖乳杆菌As21和植物乳杆菌Bs48。