【摘 要】
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本实验利用原子力显微镜观察小鼠耐不同浓度氨甲喋呤(MTX)的3T3细胞及人卵巢癌细胞UACC-1598中DMs的结构特点。为研究DMs复制的具体时间,本实验用双胸苷同步化法使UACC-1598细
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本实验利用原子力显微镜观察小鼠耐不同浓度氨甲喋呤(MTX)的3T3细胞及人卵巢癌细胞UACC-1598中DMs的结构特点。为研究DMs复制的具体时间,本实验用双胸苷同步化法使UACC-1598细胞同步于G1/S期交界,再释放至S期早、中、晚3个时相,通过染色体提前凝集技术得到3个时间段的染色体分裂相,在分辨率极高的原子力显微镜下观察DMs复制的具体情况。
结果发现DMs在S早期多数为双体,仅少量为单体;S中期双体多于早期;至S晚期基本都为双体。另外本实验用浓度逐步增加的氨甲喋呤(MTX)诱导正常小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3耐药,耐MTX25μmol/L时产生光镜可见的DMs。3T3R500细胞经MTX药物筛选可获得耐受300μmol/LMTX的细胞群体(3T3R500MTX300),将两种不同耐药量细胞中DMs的大小、数量进行比较。NIH3T3耐药细胞产生的DMs与高耐药浓度的3T3R500MTX300细胞中的DMs在大小的差别上没有统计学意义,但前者DMs的数量少,而且并不是所有分裂相中都含有DMs。
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