论文部分内容阅读
背景和目的：鼻咽癌在欧洲、美洲、大洋洲都颇罕见,非洲有些国家的鼻咽癌发病率略高,但在东南亚各国和我国比较多见。在我国,鼻咽癌主要多见于南方的广东、广西、湖南、福建、江西、海南等省区。局部放疗是鼻咽癌最主要的治疗手段,化疗药物治疗是鼻咽癌综合治疗的重要组成部分,尤其对复发或已转移的晚期患者具有重要意义。放化疗结合综合治疗已成为鼻咽癌的主要治疗方法之一,顺铂(cisplatin, DDP)是目前化疗中经常使用的一种化疗药物,对提高患者5年生存率和减少远处转移有着重要作用,但是临床效果不理想。究其原因,鼻咽癌细胞的多药耐药性(Multidrug resistance, MDR)可能是影响疗效的重要原因。有学者研究表明,中药配合治疗鼻咽癌,既能增加放射敏感性,又可以减轻放射引起的不良反应、提高免疫功能,中药辅助放化疗治疗鼻咽癌日益受到重视；中药配合化疗也能起到增效减毒作用,这对放化疗是很有益的补充。目前中药抗肿瘤多药耐药是众多学者专家研究的主流,基于我国中药资源非常丰富,从中寻找低毒高效的MDR逆转剂就具有了相当大的潜力。苦参碱是传统中药苦参的主要生物碱之一。其抗肿瘤作用包括抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞分化、促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞粘附转移、逆转肿瘤细胞耐药性、调节肿瘤宿主免疫功能等多个方面。但由于其生物利用率不高且存在一定的毒副作用,广西大学王立升教授在苦参碱的基础上通过化学方法合成了苦参碱衍生物。本实验研究了苦参碱及其衍生物对人鼻咽癌耐药细胞HONE1/DDP的逆转耐药作用。方法：采用逐渐增加剂量的方法,诱导建立人鼻咽癌细胞HONE1耐顺铂细胞株HONE1/DDP;将不同浓度苦参碱及其衍生物按倍比稀释浓度分别加入到HONE1/DDP中,测定其细胞毒性；MTT法测定非细胞毒性浓度苦参碱及其衍生物对HONE1/DDP细胞株的逆转作用,流式细胞仪检测药物作用后细胞周期分布,并以Western blot测定MRP1、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果：HONE1/DDP细胞系对DDP耐药；经苦参碱、苦参碱衍生物作用24小时后,HONE1/DDP细胞株对DDP的耐药性下降,逆转指数分别为1.45、1.77；经非细胞毒性浓度苦参碱处理的HONE1/DDP,细胞周期Go/Gl比例较HONE1/DDP组及苦参碱衍生物组明显增加(p<0.05)；经非细胞毒性浓度苦参碱衍生物处理的HONE1/DDP,细胞周期S期比例较HONE1/DDP组及苦参碱组明显减少(p<0.05); HONE1/DDP细胞的MRP1表达显著高于HONE1(P<0.05),而经苦参碱、苦参碱衍生物作用后MRP1表达显著降低(P<0.05),且二者作用后Bax表达水平降低,Bcl-2表达水平升高,Bax/Bcl-2比值降低(p<0.05),但苦参碱组与苦参碱衍生物组之间差异无统计学意义(p>0.05)。结论：人鼻咽癌细胞株HONE1对顺铂耐药,其耐药机制可能与增加MRP1的表达有关；苦参碱及其衍生物可以逆转HONE1/DDP对顺铂的耐药性,逆转倍数分别为1.45、1.77。其机制可能与其下调MRP1的表达、降低Bax/Bcl-2比值及延缓细胞周期向下进行有关。