黄连木辐射诱变的效应分析及组织培养体系的建立

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黄连木(Pistacia chinensis Bunge),是多年生木本油料植物,种子含油率高,可用于生产生物柴油,是我国极具开发利用前景的生物质能源树种。但黄连木童期长、病虫害严重,通过辐射诱变,希望能选育到早开花、抗虫的优良突变体进而选育优良单株,为生物柴油产业提供原料。此外,黄连木主要通过播种和嫁接繁殖,但出芽率和成活率都不是很高,本研究的另一目的在于通过组织培养技术进行繁殖,保持优良树种的遗传稳定性,探讨进一步提高其繁殖系数的可能性。本研究主要包括两个方面:以钴60γ射线辐照、(20)~Ne氖离子注入、(14)~N氮离子注入黄连木种子,研究其生物学效应,并对得到的突变体进行筛选和鉴定;以茎段、嫩枝段、叶片、种子为外植体,研究了黄连木组织培养中腋芽诱导、生根诱导、愈伤诱导及种子萌发等,建立了茎段诱导的再生体系。结果表明:一、辐射对黄连木的生物学效应研究1、钴60γ射线辐照、(20)~Ne氖离子注入、(14)~N氮离子注入黄连木,都导致黄连木种子萌发率降低,且与剂量呈负相关。2、钴60γ射线辐照黄连木种子,使其成苗率和苗高降低,与对照差异显著,且与剂量呈负相关。3、γ射线辐照处理的黄连木幼苗与对照相比出现了矮化、株型不对称、叶脉失绿、叶片卷曲等畸形现象。4、钴60γ射线辐照对黄连木是较合适的诱变方法,200Gy是适宜的诱变剂量。二、黄连木组织培养与快速繁殖体系的研究1、茎段腋芽诱导的最适培养基:1/2DKW+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L +IBA0.1mg/L + PVP1.3g/L +葡萄糖15g/L +琼脂6.5g/L。2、生根诱导的最优培养基:1/2MS+IBA3.0mg/L+NAA0.02mg/L+葡萄糖15g/L+PVP1.3g/L+琼脂6.5g/L。3、叶片诱导愈伤最优培养基:1/2 DKW+2,4-D 0.5 mg/L+ PVP1.3%+葡萄糖1.5%+琼脂0.65%。嫩枝段和茎段诱导愈伤最优培养基相同:1/2WPM+2,4-D 0.5mg/L+ PVP1.3%+葡萄糖1.5%+琼脂0.65%。4、黄连木种子萌发的最适培养基为1/2MS和DKW。考虑到培养基对幼苗根长和苗高的影响,黄连木幼苗生长的最适培养基为1/2DKW。黄连木种子萌发的最优无机盐和糖类组合为DKW大量减半+DKW微量、铁盐、有机减半+葡萄糖3g。5、在苗期,不同浓度赤霉素对黄连木株高产生了不同的影响,呈现明显的低浓度促进生长、高浓度抑制生长的趋势。用100mg/LGA3处理的植株株高远高于其他浓度。
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