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目的：研究心血瘀阻证心肌微环境对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells BMSCs)向心肌样分化的作用及养心通脉有效部位方(active principle region of Yangxin Tongmai Formula apr-YTF)对其影响。方法：(1)理论探讨：通过对“微环境(microenvironment)"概念,发展历史,及当前学术趋势的检索,从理论上探讨微环境的概念、学术发展趋势、心血瘀阻证心肌微环境的变化特点及其对BMSCs移植的影响,并为从改善微环境的角度寻求中医药干预BMSCs向心肌分化提供理论依据。(2)实验研究：①建立大鼠急性心梗心血瘀阻证模型,随机分为A、B两部分,A部分取大鼠心肌组织,用ELISA方法观测其基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2 MMP-2)、基质金属蛋白酶9 (matrix metalloproteinase-9 MMP-9)的表达；用Western-Blots方法检测细胞分化相关信号转导通路PI3K、p38中相关蛋白的变化。B部分动物模型在梗死心肌部位移植BMSCs观测其上述指标；同时用免疫组化双染的方法观测梗死心肌组织中结蛋白Desmin、肌球蛋白重链MHC的表达,用RT-PCR的方法检测心肌转录因子GATA-4 mRNA的表达,然后分析心肌分化指标和MMP-2、MMP-9,信号转导通路PI3K、p38相关蛋白表达的相关性。②建立大鼠急性心梗心血瘀阻证模型,在梗死心肌部位移植BMSCs;并用apr-YTF进行干预。用ELISA方法观测心肌组织中MMP-2、MMP-9的表达；用Western-Blots方法检测心肌组织中细胞分化相关信号转导通路PI3K、p38中相关蛋白的变化。同时用免疫组化双染的方法观测其心肌结蛋白Desmin、肌球蛋白重链MHC的表达,用RT-PCR的方法检测心肌转录因子GATA-4 mRNA的表达,然后分析上述心肌分化指标和MMP-2、MMP-9、信号转导通路PI3K、p38中相关蛋白的相关性。③体外模拟急性心梗心血瘀阻证微环境,在此微环境下培养BMSCs并用apr-YTF进行干预。用ELISA方法观测其培养液中MMP-2、MMP-9的表达；用Western-Blots方法检测细胞分化相关信号转导通路PI3K、p38中相关蛋白的变化。同时用免疫细胞化学方法观测其心肌结蛋白Desmin、肌球蛋白重链MHC的表达,用RT-PCR的方法检测心肌转录因子GATA-4 mRNA的表达,然后分析上述心肌分化指标和MMP-2、MMP-9,信号转导通路PI3K、p38中相关蛋白的相关性。结果：(1)接受BMSCs移植后可见心血瘀阻证心肌梗死边缘区有Desmin-Brdu、MHC-Brdu两种蛋白的同时表达,而在假手术组和健康对照组未见双染细胞表达。GATA-4 mRNA心血瘀阻证组高于假手术组(P＜0.05),而健康对照组的心肌中未检出表达。(2)未作BMSCs移植各部分MMP-2心血瘀阻证表达高于健康对照和假手术组(P＜0.05),接受BMSCs移植后大鼠心肌组织各组间未见统计学差异(P＞0.05)；相同组别内部比较心血瘀阻证组移植BMSCs部分表达低于未作BMSCs移植部分(P＜0.05)。未作BMSCs移植各部分MMP-9三组间均有差异,其中心血瘀阻证组最高,其次为假手术组、健康对照组(P＜0.05),接受BMSCs移植后心血瘀阻证组和假手术组低于健康对照组(P＜0.05),相同组别内部比较心血瘀阻证组移植BMSCs部分表达低于未作BMSCs移植部分(P＜0.05)。未作BMSCs移植各组大鼠心肌组织p-Akt统计学未见明显差异(P＞0.05),接受BMSCs移植心血瘀阻证表达高于健康对照和假手术组(P＜0.05),相同组别内部比较心血瘀阻证组和健康对照组中移植BMSCs部分表达高于未作BMSCs移植部分(P＜0.05)。未作BMSCs移植各组p-p38数据统计学未见明显差异(P>0.05),接受BMSCs移植后各组大鼠心肌组织,各组之间未见差别(P＞0.05),相同组别内部比较心血瘀阻证组中移植BMSCs部分表达高于未作BMSCs移植部分(P＜0.05)。各组标本GATA-4 mRNA与MMP-9、p-p38含量表达呈正相关,而与MMP-2、p-Akt未见显相关性。(3)apr-YTF干预BMSCs移植心血瘀阻证心肌后经心肌结蛋白Desmin-Brdu抗体染色后,其中(rhG-CSF)+BMSCs组和(apr-YTF)+BMSCs组阳性细胞计数均高于NS+BMSCs组(P＜0.05),前两者之间无差别(P＞0.05)。MHC-Brdu抗体染色后,(rhG-CSF)+BMSCs组和(apr-YTF)+BMSCs组阳性细胞计数与高于NS+BMSCs组(P＜0.05),前两者之间无差别(P＞0.05)。GATA-4 mRNA IOD值半定量分析NS+BMSCs组、(rhG-CSF)+BMSCs组和(apr-YTF)+BMSCs组均高于NS+DMEM组,(apr-YTF)+BMSCs组高于NS+BMSCs组(P＜0.05)。(4) apr-YTF干预BMSCs移植心血瘀阻证心肌酶联免疫吸附法检测显示MMP-2 (apr-YTF)+BMSCs组表达低于NS+DMEM组和NS+BMSCs组(P＜0.05和P＜0.01)。MMP-9各组间未见差异(P＞0.05)。经对Western-Blots法检测p-Akt (apr-YTF)+BMSCs组表达高于NS+DMEM组、NS+BMSCs组和(rhG-CSF)+BMSCs组(P＜0.05)。p-p38 (apr-YTF)+BMSCs组表达高于NS+DMEM (P＜0.05),其余各组间未见统计学差异(P＜0.05)。(5)体外模拟心血瘀阻证微环境对BMSCs诱导后,在正常对照组和DMEM组中未发现Desmin及MHC阳性细胞；心血瘀阻证组、apr-YTF组和心血瘀阻证+(apr-YTF)组Desmin及MHC免疫组化染色均可见弱阳性免疫复合物。Desmin的表达的IOD值在在心血瘀阻证组和心血瘀阻证+(apr-YTF)组均高于apr-YTF组(P＜0.05)。MHC的表达的OD值在在心血瘀阻证组和心血瘀阻证+(apr-YTF)组均高于apr-YTF组(P＜0.05),但是前两者之间无统计学差异。心血瘀阻证组和心血瘀阻证+(apr-YTF)组GATA-4 mRNA相对光密度值与正常对照组比较差异具有统计学意义(P＜0.05和P＜0.01)。(6)体外模拟心血瘀阻证微环境细胞培养上清液MMP-2的质量浓度以心血瘀阻证+(apr-YTF)组含量最高,与正常对照组、DMEM组和apr-YTF组比较有统计学差异(P＜0.05)。MMP-9的质量浓度心血瘀阻证组和心血瘀阻证+(apr-YTF)组两个组高于DMEM组和apr-YTF组(P＜0.05)。BMSCs诱导28d后,信号转导通路中p-Akt以心血瘀阻证+(apr-YTF)组含量最高,与DMEM组、心血瘀阻证组和apr-YTF组比较周统计学差异(P＜0.05)。而p-p38各组间含量表达未见统计学差异(P＜0.05)结论：(1)心梗心血瘀阻证心肌微环境可以促进BMSCs向心肌样细胞分化；apr-YTF可以起到促进作用。(2)心梗心血瘀阻证心肌微环境中MMP-2、MMP-9表达增高,促使BMSCs迁移分化。BMSCs移植后心血瘀阻证心肌微环境中MMP-2、MMP-9含量表达降低,从而减轻组织降解,瘢痕形成,控制心梗后向心衰的发展。apr-YTF可以降低心梗心血瘀阻证心肌组织中MMP-2、MMP-9表达。(3)心梗心血瘀阻证心肌微环境中PI3K信号转导通路激活。BMSCs移植后心肌微环境中心肌样细胞分化及与PI3K及p38信号转导通路激活有关。apr-YTF能促使移植的BMSCs向心肌样细胞分化,其分化机制与PI3K及p38信号转导通路激活有关。(4)体外模拟的心血瘀阻证微环境可以诱导BMSCs向心肌样细胞分化。apr-YTF在体外可以诱导BMSCs向心肌样细胞分化。(5)体外模拟的心血瘀阻证微环境MMP-2、MMP-9可以促使BMSCs向心肌样细胞分化。在体外模拟的心血瘀阻证微环境中BMSCs向心肌样细胞分化及apr-YTF的干预作用与PI3K信号转导通路激活有关。