目的:初步探讨EB病毒(EBV)BARF1基因对胃癌细胞生物学行为的影响,以进一步了解BARF1基因的功能及其在EBV相关胃癌(EBVaGC)发生中的作用。方法:1)从EBV阳性细胞株B95-8中提取DNA作为模板,以PCR扩增出BARF1编码基因片段,克隆到pGME-T质粒,经DNA序列分析证明与GenBank公布的基因序列一致。最后连接到真核表达载体pSG5。2)将重组表达载体pSG5-BARF1和空载体分别转染胃癌细胞系SGC7901,通过G418筛选出抗性细胞单克隆。挑取克隆扩大培养,提取总RNA,用RT-PCR检测BARF1的mRNA,以确认其表达。3)采用细胞计数法和MTT法对比分析BARF1表达组细胞和载体对照组细胞的增殖状态,软琼脂集落形成试验分析细胞肿瘤源性,细胞计数法、Hoechst33342荧光染色法和凝胶电泳检测DNA梯状条带(DNA ladder)法分析顺铂(DDP)诱导的细胞凋亡,细胞迁移试验分析细胞的迁移,以了解BARF1表达对细胞生物学行为的影响。结果:1)PCR扩增出BARF1基因,长度为697 bp,与GenBank公布的序列一致;2)成功构建真核表达载体pSG5一BARF1,转染胃癌细胞系SGC7901后获得了BARF1表达的细胞克隆;3)BARF1表达能够促使胃癌细胞系SGC7901的增殖,抑制顺铂诱导的细胞凋亡,增强非锚定依赖性生长,加快细胞的迁移。结论:BARF1对胃上皮细胞具有致癌能力,可能在EBVaGC发生与演化过程中起重要作用。