从人参皂苷的构效关系看,糖或者糖链对人参皂苷发挥生物学活性起到重要作用,鉴于多糖经硫酸化修饰后表现良好的活性,人参皂苷修饰的着眼点应放在其分子结构的羟基上。本课题采用氯磺酸-吡啶法对人参皂苷进行了探索性硫酸化修饰,在人参总皂苷成功硫酸化修饰的基础上,又改变技术路线对人参皂苷Rh2进行了硫酸化修饰,通过HPLC或反向硅胶柱层析分离技术,成功分离到2个Rh2硫酸化衍生的新化合物,IR光谱证明其分子上有硫酸酯键存在,质谱显示分子量均为724,表明在Rh2分子-OH上H被1个-SO3Na基团取代,核磁共振波谱证明他们是一对同分异构体,分别简称为SRh2-1、SRh2-2。为了评价硫酸化人参皂苷衍生物的免疫学活性,利用细胞培养技术、流式细胞术和RT-PCR技术,采用MTT法、ELISA法、乳酸脱氢酶释放法,从体内、体外两个方面比较了人参总皂苷、Rh2及他们的衍生物对免疫活性的影响。实验结果表明,硫酸化衍生物与人参总皂苷相比,对淋巴细胞活性影响更强,更减少对IL-2的分泌抑制,更能提高IFN-γ的分泌,对NK细胞的活性影响比人参总皂苷更强;Rh2促进NK细胞的杀伤活性,而Rh2衍生物没有这一作用;口服人参总皂苷和衍生物未能改变MDV所致鸡淋巴细胞数相对增多,实验表明人参总皂苷能改善人工感染MDV模型鸡淋巴细胞增殖抑制和NK细胞的杀伤活性抑制。衍生物未能改善MDV所致的鸡淋巴细胞增殖抑制和NK细胞的杀伤活性抑制,人参总皂苷及衍生物均能增强人工感染MDV模型鸡淋巴细胞IFN-γmRNA的表达,且衍生物作用更强。这些结果证实,人参皂苷硫酸化修饰后能提高其免疫活性。