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背景和目的:骨质疏松症是代谢性骨病变,主要特征是骨组织量减少及骨微结构退化,骨质疏松可增加骨脆性和骨折。然而,骨质疏松症的分子机制仍不明确。糖皮质激素直接作用于成骨细胞,导致成骨细胞产生量减少,并引起成骨细胞凋亡。长链非编码RNA(LncRNA)已成为控制基因表达和影响多种生物过程的重要表观遗传调节因子。越来越多的证据表明LncRNA参与骨重塑,与骨质疏松的发生、发展密切相关。人成骨细胞中,地塞米松(Dex)处理导致显著的细胞毒性。LncRNA EPIC1(Lnc-EPIC1)是与Myc直接作用的LncRNA。本论文主要检测了 Lnc-EPIC1对Dex诱导的人成骨细胞损伤的潜在影响及机制研究。研究方法和内容:在OB-6人成骨细胞株和原代人成骨细胞中,通过慢病毒包裹Lnc-EPIC1 载体(“LV-EPIC1”)过表达 Lnc-EPIC1;并通过 siRNA 手段沉默 Lnc-EPIC1的表达。上述细胞用Dex处理后,用实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测Lnc-EPIC1的表达;通过MTT(3-(4,5-二甲基-2-噻唑基)-2,5-二苯基-2H-四唑溴化物)法、乳酸脱氢酶(LDH)法和组蛋白-DNA酶联免疫吸附(ELISA)等方法分别检测细胞活力、细胞死亡和细胞凋亡;并用JC-1染色法和线粒体免疫共沉淀(Mito-IP)等方法检测细胞程序性坏死。收集Dex给药患者的坏死股骨头组织和周边正常组织,观察Lnc-EPIC1的表达情况。通过腺病毒载体过表达Myc,反之通过CRISPR/Cas-9基因编辑方法敲除Myc,观察处理后Dex诱导的成骨细胞损伤的变化。研究结果:在OB-6成骨细胞和原代人成骨细胞中,用Dex处理增加Lnc-EPIC1的表达。Lnc-EPIC1表达水平也在服用Dex患者的坏死股骨头组织中上调。通过慢病毒载体LV-EPIC1强制过表达Lnc-EPIC1,抑制了 OB-6细胞和原代人成骨细胞中Dex诱导的细胞死亡、凋亡和程序性坏死。相反,通过siRNA靶向沉默Lnc-EPIC1增强了 Dex诱导的细胞死亡、凋亡和程序性坏死。Myc是OB-6细胞中Lnc-EPIC1的主要靶标。Myc的外源过表达保护了 OB-6细胞免受Dex的侵害,模拟Lnc-EPIC1的成骨细胞作用。相反,通过CRISPR/Cas-9基因编辑方法的Myc敲除消除了针对Dex的Lnc-EPIC1-诱导的OB-6细胞保护作用。结论:通过调节Myc,Lnc-EPIC1表达可以保护人成骨细胞免受Dex损伤。