被孢霉△-脂肪酸脱氢酶基因转化大豆的研究

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γ-亚麻酸(γ-linolenic acid,GLA)是人体必需的不饱和脂肪酸,作为花生四烯酸、前列腺素和白三烯等生理活性物质的前体,对人体的激素调节及脂肪酸代谢发挥着重要的生理作用.△<6>-脂肪酸脱氨酶(delta 6 fatty acid desaturase,D6D)是形成γ-亚麻酸的限速酶.大豆是主要的油料作物之一,富含亚油酸,亚油酸含量占脂肪酸总量的40﹪-60﹪,而不含γ-亚麻酸或γ-亚麻酸的含量极低.该研究构建植物表达载体pBMICL6、pGMICL6和pGMICL6转入根癌农杆菌LBA4404中,以这些工程菌对大豆进行转化试验.抗性再生植株进行PCR检测,得到了大约1﹪的转基因植株.经过Southern分子杂交分析,证明△<6>-脂肪酸脱氢酶基因已导入并整合到大豆基因组中.Northern分子杂交分析显示该基因在mRNA水平上得到了表达.将转基因大豆T<,1>代和T<,2>代种子进行脂肪酸GC分析,结果在大豆种子中检测到△<6>-脂肪酸脱氢酶基因的产物GLA,证明该基因在大豆中得到了表达,所检测的种子中GLA含量最高可达27.067﹪.该基因能够稳定的遗传给后代.这是迄今为止,△<6>-脂肪酸脱氢酶基因在油料作物大豆中成功获得表达的首次报道.
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