植物再生技术是遗传转化的基础,在农业生产、植物保护等方面都起到促进作用。但不同种类的植物在再生能力上表现出巨大差异,部分植物的再生存在困难(如:水稻、玉米等的成熟组织),菜豆(Phaseolus vulgarisL.)亦为难再生植物中的一种。本研究以菜豆为试验材料,对其进行了不定芽诱导的研究,同时也为其它难以再生植物不定芽的诱导提供参考。主要研究结果如下:首先,以菜豆下胚轴为外植体,探究不同浓度组合的生长素(2,4-D、NAA、IBA)和细胞分裂素(6-BA、TDZ、KT)对其愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明,多数组合的愈伤组织诱导率为100.00%,而MS培养基中则无愈伤组织的形成。其中,MS+1.5μmol·L-1NAA+1 μmol·L-1TDZ培养基中愈伤组织的平均鲜重和平均干重最高分别为1.0322±0.0386 g和0.0868±0.0016 g,但愈伤组织皆呈褐色,质地疏松,且无不定芽产生。后以MS+1.5μmol·L-1NAA+1μmol·L-1TDZ为基本培养基,以下胚轴为外植体,探究活性炭、抗坏血酸、硝酸银对抑制愈伤组织褐化的影响。结果表明,愈伤组织褐化并没有得到减轻。由于菜豆下胚轴在诱导愈伤组织的过程中出现褐化,且无法产生不定芽,故更换外植体取材部位,尝试以菜豆的根段为外植体,探究不同浓度组合的生长素(2,4-D、NAA、IBA)和细胞分裂素(6-BA、TDZ、KT)对根外植体愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明,多数组合的愈伤组织诱导率为100.00%,而MS培养基中无愈伤组织的形成。其中,最佳诱导培养基为MS+1 μmol·L-12,4-D+10μmol·L-1TDZ,愈伤组织平均鲜重及平均干重最大分别为0.2971±0.0189 g和0.0317±0.0017g,且愈伤组织呈淡绿色,结构致密,但无不定芽产生。为获得不定芽,以MS+1 μmol·L-12,4-D+10μmol·L-1TDZ诱导的根愈伤组织为试验材料,探究不同浓度组合的NAA、IBA和6-BA、TDZ、KT对愈伤组织继代培养和分化的影响。结果表明,外植体在含有IBA和TDZ的MS培养基中可以诱导出具有最大鲜重和最大干重的愈伤组织,但愈伤组织呈深褐色,质地疏松。后探究一种生长素(NAA、IBA)和两种细胞分裂素(6-BA、TDZ、KT )的不同浓度组合对愈伤组织继代培养和分化的影响。结果证明,与单独使用一种细胞分裂素相比,同时使用两种细胞分裂素诱导出的愈伤组织结构呈褐色,质地疏松,不利于不定芽的诱导。基于以上研究以及对相关文献的综合分析,采用含有10μmol·L-1TDZ的MS培养基对菜豆种子进行预培养,并以菜豆上胚轴薄片为外植体,以B5液体培养基为基本培养基,探究不同浓度6-BA或TDZ对菜豆再生的影响。结果表明,当TDZ浓度为15 μmol·L-1时,诱导不定芽的效果最好,不定芽诱导率为25%。