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短暂性脑缺血性发作(transient ischemic attacks,TIA)是指由多种原因引发局灶性脑缺血,进而导致的突发性、短暂性、可逆性神经功能障碍。TIA易反复发作,既往有一过性TIA病史的患者再次发生脑卒中的风险明显增加,致残率、病死率更高。血清微小核糖核酸(microRNAs,miRNAs)是近年来的研究热点,与缺血性脑血管疾病的发生、发展密切相关,但有关TIA患者血清miRNAs表达水平及其变化尚缺乏系统性的研究,血清miRNAs对TIA预测及TIA后再发卒中风险评估的临床价值仍有待进一步研究探讨。目的:通过分析TIA患者血清miRNAs水平变化,筛选TIA患者血清特异变化的miRNAs,比较并探讨血清miRNAs及现有脑损伤相关血清学标志物,对TIA预测及TIA后再发卒中风险评估的临床价值,以期为临床TIA患者的病情评估与监测提供新的途径与理论依据。方法:选取126例TIA患者和44例对照者,依据TIA患者再发卒中风险评估体系ABCD3-I评分,将其分为低危(0～3分,46例)、中危(4～7分,45例)、高危(8～13 分,35 例)三组。采用实时荧光定量 PCR(quantitative reverse-transcription PCR,qRT-PCR)技术,检测候选的13种与缺血性脑血管疾病相关的miRNAs,在TIA患者和对照者血清中的相对表达水平(包括miR-15b、miR-30a、miR-21、miR-29b、miR-181 a、miR-124、miR-335、miR-146a、miR-499、miR-144、miR-208b、miR-215和miR-23b),以筛选TIA患者血清特异变化的miRNAs。同时,检测TIA患者脑损伤相关血清学标志物的水平,包括血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2)、氧化低密度脂蛋白(Oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)、神经元特异性烯醇化酶(Neuron-Specific Enolase,NSE)和脑源性神经营养因子(Brain Derived Neurotrophic Factor,BDNF)。采用 Spearman 相关性分析,探讨血清 miRNAs 和脑损伤相关血清学标志物之间的相关性。采用受试者工作曲线(receiver operating characteristic curves,ROC)分析和多元 Logistic 回归分析,比较并探讨血清miRNAs及脑损伤相关血清学标志物应用于TIA预测及TIA后再发卒中风险评估的临床价值。结果:一、qRT-PCR 结果显示,TIA 患者组血清 miR-23b-3p、miR-208b、miR-215、miR-181a-5p水平较对照组均显著升高(P均<0.05);TIA患者中,高危组、中危组、低危组的血清 miR-23b-3p、miR-208b、miR-215、miR-181a-5p 水平也较对照组均显著升高(P均<0.05)。相关性分析显示,上述四种miRNAs水平两两之间均呈显著正相关(P均<0.05)。二、TIA患者组血清Lp-PLA2、ox-LDL及NSE水平较对照组均显著升高(P均<0.05);TIA患者中,仅高危组患者血清Lp-PLA2、ox-LDL及NSE水平较对照组显著升高(P均<0.05)。相关性分析显示,血清Lp-PLA2与ox-LDL水平呈显著正相关(r= 0.264,P=0.002)、NSE与BDNF水平呈显著正相关(r=0.197,P=0.041)。三、ROC曲线分析结果显示,血清miR-23b-3p、miR-208b、miR-215和miR-181a-5p区分TIA患者与对照者的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为 0.784、0.795、0.768 和 0.779(P 均<0.01),四种 miRNAs 的组合区分 TIA患者与对照者的AUC为0.812(P=0.001);血清Lp-PLA2和NSE区分TIA患者的AUC分别为0.725和0.743(P均<0.05),两指标的组合区分TIA患者与对照者的AUC为0.817(P=0.001);四种miRNAs联合Lp-PLA2和NSE的组合区分TIA患者与对照者的AUC为0.925(P<0.001)。四、以TIA患者不同危险分层组及对照组作为独立的四分类变量,以对照组作为参照类别,分别对血清miRNAs和脑损伤相关指标进行多元Logistic回归分析。单因素Logistic回归分析结果显示,血清高miR-23b-3p、miR-208b、miR-215水平均与TIA患者发生卒中的各层风险相关;血清高Lp-PLA2、ox-LDL、NSE及BDNF水平均与TIA患者发生卒中的高风险相关,高NSE水平还与TIA患者发生卒中的中、低风险相关。多因素Logistic回归分析结果显示,在调整年龄、性别、血压和血脂参数的影响后,血清miR-23b-3p水平的升高仍与TIA患者发生卒中的高、中风险密切相关,miR-208b水平的升高仍与TIA患者发生卒中的高风险密切相关;血清Lp-PLA2、ox-LDL及NSE水平的升高仍与TIA患者发生卒中的高风险密切相关,Lp-PLA2、NSE水平的升高仍与TIA患者发生卒中的中、低风险密切相关。结论:TIA 患者血清 miR-23b-3p、miR-181a-5p、miR-208b 及 miR-215 水平显著增加,上述miRNAs有望成为TIA预测及TIA后卒中风险评估的新型生物标志物,为临床TIA患者的病情评估与监测提供新的途径与理论依据。