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目的：鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)是我国南方各省常见的恶性肿瘤,治疗手段首选放射治疗。放射治疗对早期鼻咽癌效果较好,但对晚期鼻咽癌因易出现远处转移和局部复发,因此疗效欠佳。RNA干扰技术是当今研究鼻咽癌基因治疗领域的一个热点。有研究证实,Bcl-2(B-cell Leukemia2)与鼻咽癌的细胞增殖、凋亡有密切关系,本研究的目的是采用RNA干扰技术抑制Bcl-2基因在鼻咽癌CNE-2细胞中的表达,并行转染后细胞x射线照射,探讨特异性Bcl-2siRNA对鼻咽癌细胞的辐射增敏作用。
方法：⑴构建Bcl-2基因的特异性siRNA的表达载体,并借助脂质体将其转入鼻咽癌CNE-2细胞。荧光显微镜观察转染效率。⑵AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞技术检测转染后Bcl-2蛋白在鼻咽癌细胞的表达,并检测鼻咽癌CNE-2细胞的凋亡率。⑶流式细胞仪检测Bcl-2基因的特异性siRNA真核表达载体联合x射线照射后鼻咽癌CNE-2细胞的凋亡率。
结果：①利用脂质体法将Bcl-2 siRNA成功导入鼻咽癌CNE-2细胞。②流式细胞仪检测结果显示:转染组明显降低了Bcl-2蛋白在鼻咽癌CNE-2细胞的表达,且转染组的细胞凋亡率明显增加。③转染联合x射线照射后细胞凋亡率明显增加,且明显高于单纯转染组和单纯x线照射组。
结论：siRNA可以有效干扰鼻咽癌CNE-2细胞内Bcl-2基因的表达,可明显增强鼻咽癌CNE-2细胞的放射敏感性。