原花青素对反式脂肪酸致雄性小鼠生殖毒性的保护作用

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目的:1.观察不同剂量反式脂肪酸(Trans Fatty Acids,TFA)对雄性小鼠的生殖毒性作用;2.初步探讨原花青素(proanthocyanidins,PC)对反式脂肪酸致雄性小鼠生殖损伤保护效果及可能机制,为评价PC对TFA致生殖损伤的保护作用提供实验依据。方法:以TFA和PC为受试物,以健康成年昆明(KM)种雄性小鼠为实验对象。将96只小鼠随机分为8组:对照组、低、中、高剂量TFA染毒组、PC对照组、L-TFA+PC保护组、M-TFA+PC保护组、H-TFA+PC保护组;3个剂量TFA染毒组:分别按低(TFA25mg/kg)、中(TFA50mg/kg)、高(TFA100mg/kg)TFA染毒剂量给小鼠灌胃90天,隔天一次,上午灌胃TFA、下午灌胃等量的生理盐水;3个PC保护组:染毒剂量、时间同染毒组,上午灌胃TFA、下午每组灌胃同剂量的(100mg/kg)PC;对照组灌胃生理盐水、PC组灌胃(100mg/kg)PC。各组动物灌胃体积为10ml/kg.bw。实验结束后取血处死动物,取睾丸、附睾和肾脏分别称重并计算其脏器系数;常规病理学切片,HE染色观察睾丸病理形态变化;光学显微镜下观察精子质量的改变;全自动生化分析仪检测血清T、LH、FSH水平;试剂盒测定MDA、SOD、GSH-Px酶的活性。结果:1.中、高剂量TFA染毒组小鼠末体重及净增体重明显高于对照组,经PC保护的高剂量TFA染毒组动物的净增体重低于同剂量染毒组(P<0.05)。2.高剂量TFA染毒组小鼠睾丸脏器系数低于对照组,经PC保护的高剂量TFA染毒组睾丸脏器系数低于同剂量染毒组(P<0.05);PC对其它各染毒组睾丸、附睾及肾脏脏器系数影响不大,差异无显著性(P>0.05)。3.睾丸病理形态显示:对照组小鼠睾丸曲细精管完整,上皮细胞层次正常,管腔中见到大量成熟精子等;TFA染毒组睾丸组织基底膜模糊不清、核间隙增宽,部分管壁脱落缺失,腔内未见精子等;给予PC保护后,睾丸组织形态较TFA染毒组有所改善,以低、中剂量TFA染毒组改善较明显,睾丸间质有所缩小,间质细胞颗粒减少,各级生精细胞数量有所增加,曲细精管上皮细胞层次趋向正常,腔内精子较多。4.与对照组比较,中、高剂量TFA染毒组小鼠精子数量、精子存活率、精子活力均降低,畸形率增加(P<0.05);经PC保护的中、高剂量TFA染毒组精子数量、精子存活率、精子活力均有不同程度的增加,畸形率减少与相同剂量染毒组比较,差别有显著性(P<0.05);精子畸形以尾折叠、卷尾、尾体弯曲、不规则精子、双尾精子为主。5.高剂量TFA染毒组小鼠血清FSH、LH、T值均低于对照组(P<0.05);经PC保护的高剂量TFA染毒组FSH、LH、T值均较同剂量的染毒组有不同程度的增加,差别有显著性(P<0.05)。6.高剂量TFA染毒组小鼠睾丸LDH-X、GGT的活性均低于对照组(P<0.05);经PC保护高剂量TFA染毒组LDH-X、GGT活性均较同剂量的染毒组有不同程度的增加(恢复),差别有显著性(P<0.05),其它各组对其酶的活性影响不明显(P>0.05)。7.与对照组比较,中、高剂量TFA染毒组小鼠睾丸MDA含量增加,SOD、GSH-Px活性降低(P<0.05);高剂量TFA染毒组CAT活性低于对照组(P<0.05);经PC保护的高剂量TFA染毒组小鼠睾丸SOD、GSH-Px、CAT活性均较同剂量的染毒组增加(P<0.05);PC保护的中剂量TFA染毒组睾丸GSH-Px活性高于同剂量的染毒组(P<0.05);其它各组酶的活性及氧化产物MDA含量影响不明显(P>0.05)。结论:1.不同剂量反式脂肪酸(TFA)亚慢性染毒雄性小鼠可致生殖系统损伤,高剂量TFA对生殖功能损伤严重。2.采用100mg/kg.bw剂量原花表素(PC)可修复TFA致雄性小鼠生殖系统的损伤作用;3.抗氧化作用是PC保护(修复)TFA所致雄性生殖损伤的重要机制之一。
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