红根草化学成分研究

来源 :广西师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gengjie_1986
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红根草(Salvia prionitis Hance)为唇形科(Lamiaceae)鼠尾草属(Salvia)植物,主要分布于我国的西南地区,在民间常用于治疗感冒、腹泻、腹痛、痢疾等疾病。根据现有的报道可知鼠尾草植物中含有丰富的萜类成分,但对红根草的有效化学成分的系统研究较少,且国内红根草质量参差不齐,质量控制标准还没建立。本实验选取鼠尾草属植物红根草作为研究对象,目的在于进一步的丰富红根草的化学成分并寻找结构新颖的化合物。对分离得到的化合物类型差别进一步选取江西上饶11月采收的红根草进行化学成分分析比对和抗人肝癌细胞株HepG2活性对比。实验方法:(1)红根草全草的化学成分分离鉴定:干燥的红根草11.6公斤机械粉碎成粉末,加入60 L95%乙醇溶液在室温下浸泡提取4次,每次5 d,提取液减压浓缩得到浸膏325.4 g。浸膏加3.5 L温水悬浮后用3.5 L乙酸乙酯反复萃取5次,得到乙酸乙酯部分的浸膏215.5 g。浸膏用甲醇充分溶解后,进一步经大孔树脂柱色谱分离,用30%乙醇,50%乙醇,80%乙醇和95%乙醇梯度洗脱,各洗脱液分别减压浓缩后得到四个相应部分A、B、C、D。C部分进一步经MCICHP20P、正相硅胶柱、ODS、Sephadex LH-20反复层析及高效液相色谱制备等现代化分离手段进行分离纯化。得到的单体化合物利用1H-NMR、13C-NMR、二维谱等核磁共振谱、高分辨质谱等多种测定方法得到波谱数据并对其分析鉴定。(2)利用HPLC、1H-NMR波谱技术分析两个产地红根草化学成分差异和MTT法进行抗人肝癌细胞HepG2的活性研究:称取等质量的红根草,甲醇渗漉提取5天,合并滤液,减压浓缩得浸膏,浸膏溶解后经大孔树脂层析柱后用水-乙醇系统(100%水、50%乙醇、80%乙醇、95%乙醇)进行梯度洗脱浓缩得浸膏;对各部位的样品进行定量HPLC、1H-NMR分析。同时运用MTT法测定各部位的抗肿瘤活性。结果:(1)从红根草全草的95%乙醇提取物中分离得到化合物17个化合物,主要类型为三萜类,二萜类及黄酮类化合物。其中三萜类化合物13个分别为:野鸦椿酸(euscaphic acid)(C4)、2α,3β,19α-三羟基-12-烯-28-乌苏酸(2α,3β,19α-trihydrox yurs-12-en-28-oic acid)(C5)、2α,3α,24-三羟基-12,20(30)-二烯-28-乌苏酸(2α,3α,24-trihydroxyurs-12,20(30)-dien-28-oic acid)(C6)、2α,3β,23-三羟基-12-烯-28-乌苏酸(2α,3β,23-trihydroxyurs-12-en-28-oic acid)(C7)、2α,3α,24-三羟基-12-烯-28-乌苏酸(2α,3α,24-trihydroxyurs-12-en-28-oic acid)(C8)、3β,6β,23-三羟基-12-烯-28-齐墩果酸(3β,6β,23-trihydroxyolean-12-en-28-oic acid)(C9)、白桦脂酸(be tulinic acid)(C10)、白桦脂醇(betulin)(C11)、高根二醇(erythrodiol)(C12)、熊果醇(uvaol)(C13)、3β,27-dihydroxy-urs-12-ene(C14)、齐墩果酸(oleanic acid)(C15)、3α,23α-二羟基齐墩果烷((3a)-olean-12-ene-3,23-diol)(C16);二萜类化合物3个分别为:丹参酚酮(salvinolone)(C2)、15-羟基-松香-8,11,13-三烯-18-酸(15-hydroxy-abiet-8,11,13-trien-18-oic acid)(C3)、salprionitone A(17);1个黄酮化合物:山奈酚-3-O-葡萄糖苷(kaempferol-3-O-glucoside)(C1);(2)在对两个产地红根草的化学成分分析时,结果表明江西上饶11月采收的红根草和广西永福3、4月采收的红根草的化学成分存在差异,且主要集中在80%乙醇部分,且药理活性测试结果表明江西上饶11月采收的红根草的80%乙醇、95%乙醇部分对HepG2的抑制作用强于广西永福3、4月采收的红根草的80%乙醇、95%乙醇部分。结论:从广西永福产红根草中分离得到17个化合物,其中化合物(C17)为C23的二萜新骨架化合物,化合物(C14)为首次从鼠尾草属中分离得到,化合物(C1)、(C4)(C5)、(C6)、(C7)、(C8)、(C9)、(C10)、(C11)、(C16)为首次从红根草中分离得到。江西上饶11月采收的红根草与广西永福3、4月采收的红根草经分离分段后发现两种红根草的各部分的化学成分和含量均有差异;活性方面,江西上饶11月采收的红根草对HepG2的抑制作用强于广西永福3、4月采收的红根草。
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