【摘 要】
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为了分离和克隆新基因,该研究综合分析数据库信息,特别是模式生物神经发育基因的同源信息,选取了部分EST作为筛先全长cDNA的探针.为了提高筛选cDNA文库的效率,为规模化分离新
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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为了分离和克隆新基因,该研究综合分析数据库信息,特别是模式生物神经发育基因的同源信息,选取了部分EST作为筛先全长cDNA的探针.为了提高筛选cDNA文库的效率,为规模化分离新基因创造条件,研究人员首先构建了含3×10<6>独立克隆点阵排列的胎儿脑cDNA文库.设计特异于EST的引物,采用PCR和杂交结合的方法筛选点阵cDNA文库.该方法具有快速、高效、特异、成本低的优点.应用该方法通过筛选脑cDNA文库,得到了数个全长cDNA序列,并通过Northern了解了它们在不同组织中的表达.该文根据与基因调控有关的HCF、与细胞的分化及形态维持有关的paralemmin<,[9,10]>和与信号传导有关的PH结构域,通过同源性比较,设计引物, 在胎脑的cDNA文库中筛出三条新全长cDNA,HC、OR2和OR3.另外,对其中的HC编码的蛋白进行了表达.
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