母马平均发情周期为21天，随着卵泡生长，雌二醇(E<,2>)分泌逐渐增多。在上次排卵第19～20天时，E<,2>达到高峰。发情排卵后，E<,2>恢复较低水平。母马配种0～35天，若妊娠，雌激素含量下降，与空怀母马间情期相似。若未妊娠，则进入下一发情周期。血清雌二醇在21天内再次逐渐升高并达峰值。因此，在配种后的下一个发情周期内，妊娠与未妊娠母马会出现血清雌二醇浓度的差异。本试验结合此特点，尝试在配种21天内，通过检测雌二醇浓度差异，建立更快捷、方便、安全、准确的母马早期妊娠诊断方法。 试验通过制备抗体，确定将母马血清雌二醇单克隆抗体酶联免疫法作为母马血清雌二醇的检测方法，其方法的线性范围为10～1000pg/ml，计算得最低检测限为20.46pg/ml。 通过建立好的酶免方法，检测16匹配种后10～21天内的母马血清雌二醇激素浓度。结合直检和超声波诊断方法，确定其中8匹妊娠，剩余8匹未妊娠。发现妊娠母马在配种后21天内血清雌二醇浓度保持较低水平，平均浓度为31.56±0.40pg/ml，最高值为48.3pg/ml。而未妊娠母马则在配种后10～21日内血清雌二醇水平缓慢升高，尤其在配种后16～21日内，雌二醇浓度达到峰值，其平均浓度为52.64±1.70p/ml，与妊娠母马血清雌二醇水平存在明显差异(P<0.01)。 以上结果发现。在配种后16天开始，隔日检测三次血清雌二醇浓度。当三次检测浓度值均低于临界值48.3pg/ml时，即可判定母马妊娠。此方法节省时间和劳动力，在采血后3～4小时，即可得出检测结果。是一种方便、快捷、有效的母马妊娠诊断方法。