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本文研究了添加米曲霉培养物和蛋氨酸羟基类似物对不同粗料底物瘤胃发酵和奶牛泌乳性能的影响。研究内容包括:1)分别以羊草、苜蓿、青贮玉米和玉米秸为底物,添加米曲霉培养物(AOC)和蛋氨酸羟基类似物(HMB),研究其对体外产气量和瘤胃发酵的影响;2)不同粗料底物添加AOC与HMB对羊草、苜蓿和青贮玉米瘤胃微生物及其酶活的影响;3)通过奶牛饲养试验,研究添加AOC与HMB对泌乳奶牛泌乳性能、瘤胃发酵和微生物菌群的影响。试验一通过体外产气试验,研究不同粗料底物添加AOC与HMB对体外瘤胃产气特性和瘤胃发酵的影响。试验底物精粗比为50:50,其中精料是玉米,粗料分别是羊草、苜蓿、青贮玉米和玉米秸之一,每种底物按照2×3因子设计,添加不同水平的AOC (0、3、6mg)和HMB (0、15mg)作为主因子。记录2,4,8,12和24h瘤胃产气量,测定培养24h的瘤胃液pH、氨态氮、挥发性脂肪酸(VFA)和微生物蛋白(MCP)含量。添加AOC与HMB显著提高底物羊草、首蓿和青贮玉米体外发酵24h的产气量、潜在产气量和有机物消化率(P<0.05),对底物青贮玉米的瘤胃发酵指标有显著的交互作用。AOC与HMB显著降低底物青贮玉米的瘤胃氨态氮浓度(P<0.05),两者有显著的交互作用(P=0.03)。MCP浓度随AOC与HMB的添加显著提高(P<0.01),两者对底物羊草和青贮玉米有交互作用。AOC和HMB显著增加底物羊草、苜蓿和青贮玉米瘤胃内总VFA浓度(P<0.01),对羊草和苜蓿瘤胃内各个VFA的摩尔比没有显著影响,显著增加底物青贮玉米乙酸摩尔比(P=0.02),显著降低丁酸摩尔比(P<0.01),对青贮玉米的乙丙比没有影响(P-=-0.06),但有交互作用(P<0.01)。AOC与HMB不影响底物玉米秸瘤胃内总VFA,但显著增加其丙酸摩尔比,降低乙丙比(P<0.01),对其他指标没有影响(P>0.05)。结果提示,AOC与HMB可以促进底物羊草、首蓿和青贮玉米的瘤胃发酵,对玉米秸没有显著影响,且对青贮玉米有交互作用。试验二根据试验一的结果,AOC与HMB对底物羊草、苜蓿和青贮玉米的体外瘤胃发酵有促进作用,因此本试验选取三种粗料发酵瘤胃液提取DNA,采用real-time PCR技术测定瘤胃内不同微生物的相对数量并测定微生物酶活。结果表明:添加AOC与HMB显著增加底物羊草和苜蓿的瘤胃真菌数(P<0.01)、底物青贮玉米瘤胃液产琥珀酸丝状杆菌(F. succinogenes)(P=0.02)、底物羊草和青贮玉米瘤胃反刍兽新月形单胞菌(S. ruminatium)(P<0.01)。添加AOC还可以增加底物羊草瘤胃发酵液的F. succinogenes (P<0.01)、黄色瘤胃球菌(Rflavefaciens)(P<0.01)和白色瘤胃球菌(R. albus)、苜蓿瘤胃发酵液R. albus数(P<0.01)。添加HMB可以显著增加青贮玉米瘤胃发酵液的R. albus (P<0.01),苜蓿底物的S. ruminatium且与AOC有交互作用(P=0.03). AOC提高羊草底物羧甲基纤维素酶(CMCase)和淀粉酶活性、苜蓿底物的木聚糖酶活性(P<0.01); HMB显著提高了苜蓿底物瘤胃内CMCase活性(P<0.01)和羊草、苜蓿底物的木聚糖酶活性(P<0.05)。AOC与HMB对羊草、苜蓿底物的CMCase和淀粉酶活性有交互作用,对三种粗料的木聚糖酶活性有交互作用。添加AOC与HMB可以显著增加羊草、苜蓿和青贮玉米底物瘤胃内纤维分解菌、反刍兽新月形单胞菌以及纤维素分解酶活性。试验三研究添加AOC与HMB对泌乳奶牛产奶性能的影响。试验选择64头经产奶牛(体重520kg,泌乳136天,日产奶31kg),按产奶量一致,泌乳天数相近原则随机分入4个组中,每组16头。4组奶牛接受不同的日粮处理:对照组Control、处理AOC(添加AOC5g/d)、处理HMB(添加HMB25g/d)和处理AM(同时添加AOC与HMB分别为5g/d和25g/d)。试验结果表明:1)各处理组干物质采食量(DMI)和产奶量没有显著差异(P>0.05)。HMB可以显著提高乳蛋白、乳脂产量和乳中总固体物(TS)含量(P=0.02),有提高3.5%FCM产量、乳蛋白率和乳脂率的趋势(P=0.07), AOC显著提高了乳糖含量(P=-0.04);2)AOC显著降低了血浆游离脂肪酸(NEFA)的浓度,HMB显著降低了血糖浓度(P=0.03);3)HMB有增加血浆Cys的趋势(P=0.07)。上述结果表明,泌乳奶牛日粮添加AOC显著降低血液NEFA含量,添加HMB增加乳蛋白、乳脂含量和产量,显著增加乳糖和TS含量,。试验四研究添加AOC与HMB对泌乳奶牛瘤胃发酵、微生物菌群的影响。试验设计同试验三,在试验的中期和末期,每组随机选取6头,采用口腔取瘤胃液的方法收集瘤胃液,测定AOC与HMB对瘤胃发酵参数、瘤胃微生物相对数量和酶活的影响。添加AOC与HMB可以显著增加瘤胃总VFA.MCP浓度(P<0.05)。添加HMB显著增加乙酸摩尔比、降低丙酸摩尔比(P<0.01),。添加AOC与HMB可以显著增加真菌、F. succinogenes和R. flavefaciens的数量,(P≤0.03),而且添加AOC与HMB显著提高了CMCase的活性(P<0.05)。结果表明,AOC与HMB可以通过增加瘤胃微生物的数量和CMCase的活性促进瘤胃发酵和提高奶牛泌乳性能。综上所述,AOC与HMB对不同粗料的体外瘤胃发酵不同,可以显著提高羊草、苜蓿和青贮玉米底物的瘤胃发酵,但是对玉米秸的瘤胃发酵没有显著影响;AOC与HMB可能主要是通过对瘤胃纤维分解菌和CMCase的影响而促进瘤胃发酵。泌乳中期奶牛日粮添加AOC与HMB对干物质采食量和产奶量没有显著影响,但是添加AOC可以促进瘤胃总VFA生成,降低血浆NEFA浓度,从而改善了奶牛能量代谢;添加HMB可提高乳蛋白和乳脂含量、产量及4%脂肪校正乳产量;添加HMB促进总挥发性脂肪酸和乙酸生成以及瘤胃微生物蛋白合成。AOC与HMB的作用推测是通过促进纤维分解菌的生长,提高CMCase的活性,改善奶牛瘤胃发酵和泌乳性能。