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临床和实验研究表明,急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome, ARDS)与多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)的发生密切相关,多数ARDS患者不同程度合并有肺外器官功能障碍。在MODS发生发展过程中,ARDS出现最早、发生率最高。ARDS实质上是一种以进行性呼吸困难和顽固性低氧血症为特征的急性呼吸衰竭。顽固性低氧血症不仅是ARDS的重要特征,也是继发多脏器损害的重要发病机制。缺氧导致器官功能损害除与细胞能量代谢障碍、代谢性酸中毒有关外,还可能与炎症细胞被激活,炎症因子大量释放有关。本研究观察缺氧对大鼠血浆中TNF-α、IL-1β浓度的影响,探寻血浆中TNF-α、IL-1β的组织或细胞来源,并进一步探讨缺氧诱导单核细胞产生TNF-α、IL-1β的信号途径和调控机制,从新的角度探讨缺氧在MODS肺启动机制中的作用,以期为MODS的临床防治提供理论依据和新策略。方法:1.采用低氧混合气(8% O2, 5% CO2, 87% N2)吸入法复制缺氧大鼠模型,检测缺氧0、1、3、6、9、12、24 h血浆、肺、心、肝、肾组织中TNF-α、IL-1β的蛋白含量(ELISA)及外周血单个核细胞TNF-α、IL-1β的mRNA表达量(RT-PCR)。2.分离纯化大鼠外周血单核细胞(peripheral blood monocyte, PBMC ),随机分为缺氧组、缺氧+Chelerythrine组、缺氧+Forskolin组,各组又分为0、1、3、6、9、12、24 h 7个时相点。缺氧组直接行低氧培养(3% O2, 5% CO2, 92% N2),后两组分别在培养基中加入10μM Chelerythrine溶液、50μM Forskolin溶液再行低氧培养(3% O2,5% CO2, 92% N2)。检测各组单核细胞TNF-α、IL-1βmRNA表达量及PKC、Raf-1、MAPK、IKK、NF-κB活性(采用RT-PCR法和相应试剂盒);观测缺氧组单核细胞膜PKCα、PKCε蛋白含量及活性(采用Western-blot法和相应试剂盒)。3. 60只缺氧大鼠模型分为缺氧组、缺氧+Chelerythrine组,各组又分为0、3、6、9、12、24 h 6个时相点。两组均吸入低氧混合气(8% O2, 5% CO2, 87% N2)。缺氧+Chelerythrine组于缺氧前静脉注射Chelerythrine (5 mg/Kg体重, 1次/12 h)。检测血浆