miR-708在宫颈癌中通过靶向Timeless抑制细胞增殖及增加顺铂敏感性

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目的:宫颈癌是全球女性肿瘤相关死亡率排第四的恶性肿瘤。已有研究报道micro RNAs(mi RNAs)通过调节基因表达在肿瘤进程起多种生物学作用。因此,我们研究了mi R-708在宫颈癌中的生物学作用。方法:通过real-time PCR检测宫颈癌组织及癌旁组织中mi R-708的表达水平。生信分析技术预测mi R-708与Timeless的相互关系,进而通过双荧光素酶报告系统及Western Blot来验证。CCK-8及克隆形成实验检测过表达mi R-708对宫颈癌细胞增殖和顺铂敏感性的影响。通过流式细胞学技术检测细胞周期及凋亡变化。彗星实验检测过表达mi R-708诱导宫颈癌细胞DNA损伤水平的变化。DNA损伤修复相关通路中的基因蛋白水平变化由Western Blot检测分析。结果:宫颈癌组织中mi R-708的表达水平显著低于癌旁组织。生信分析技术、Western Blot及双荧光素酶报告系统都说明Timeless是mi R-708的靶基因。此外,在宫颈癌细胞中过表达mi R-708抑制细胞增殖及克隆形成能力,促进凋亡,并进一步提高DNA损伤水平。过表达mi R-708通过抑制DNA损伤修复相关的ATR/CHK1信号转导通路增加宫颈癌细胞对顺铂的敏感性。结论:过表达mi R-708通过抑制DNA损伤修复通路促进宫颈癌细胞顺铂敏感性。我们的研究结果说明,mi R-708可能为未来宫颈癌治疗提供新的靶点。
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