本研究是以康氏木霉为供试菌株（6111-ET）进行几丁质酶纯化、特性的研究,并对康氏木霉几丁质酶基因进行克隆、测序和初步的生物信息学分析,为探明其抑制木材蓝变菌的作用机制,工业化生产几丁质酶制成生物制剂,应用于木材蓝变色生物控制提供科学依据。康氏木霉（Trichoderma koningii）在液态PDA培养基中置于恒温摇床（200r/min,28℃）上培养10d,诱导产生几丁质酶。培养滤液通过硫酸铵分级沉淀,Q-HP强阴离子交换柱层析、Phenyl-Sepharose疏水层析、CM-Sepharose弱阳离子交换柱层析、Phenyl-Sepharose疏水柱层析,从康氏木霉培养的上清液中分离纯化了几丁质酶。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳纯度分析表明,纯化后的几丁质酶基本达到了均一的程度,该酶的分子量约为36kDa。本研究对康氏木霉的几丁质酶的基本性质进行了测定。结果表明:该酶最适反应温度为40℃,水解几丁质的最适pH范围为3～6之间。在热稳定性方面,分别在30℃和60℃下保温80min后仍然可以保持原有的酶活力,温度过60℃以后,相对酶活开始下降;该酶对高温有一定的抵抗力,随着温度的升高,酶活力仍保持在60%左右。不同的金属阳离子对该酶都有不同的影响,Ca²⁺、Fe²⁺对酶活力有比较明显的激活作用,其中Fe²⁺的作用最强;而K⁺、Na⁺、Cu²⁺则有明显的抑制作用。本研究利用改进CTAB法提取康氏木霉总DNA,根据已发表康氏木霉几丁质酶DNA同源序列设计出引物,利用聚合酶链式反应（PCR）扩增得到几丁质酶基因片段,将其连接到pMD18-T克隆载体上,对大肠杆菌E.coliJM109进行转化。经PCR鉴定后对阳性克隆进行了序列测定,将结果同已发表木霉几丁质酶基因序列进行分析比对,发现其同源相似性达到90%以上。本研究对康氏木霉几丁质酶基因进行克隆、测序和初步的生物信息学分析,为选择高产几丁质酶工程菌株和木霉几丁质酶规模化生产打下了必要的基础。