乳源性小肽的抗衰老功效研究

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乳源性小肽,作为乳蛋白在益生菌和其他活性酶的作用下水解产生多种生物活性物质,其具有活性好、易吸收、无毒性及低致敏性等特点,主要有抗衰老、抗高血压、免疫调节及抗菌等功效,在人体健康方面具有广泛的应用前景。本课题主要分为两大部分:(1)乳源性小肽DELQ和QEPV在大肠杆菌OP50模型中的吸收和生理调节作用研究;(2)乳源性小肽DELQ、QEPV以及混合肽(DELQ:QEPV=1:1)在秀丽线虫模型中的最佳浓度、安全性、抗衰老功效及其吸收性研究。在第一部分中,分别采用不同浓度梯度的DELQ和QEPV培养大肠杆菌,检测其生长和细胞凋亡情况,并利用荧光标记肽以检验其吸收性。结果表明,实验组与空白组的OD值及MTT值生长曲线几乎重合,实验组荧光肽吸收强度也几乎与空白组相同,这说明DELQ和QEPV无法被大肠杆菌吸收,导致其对大肠杆菌不存在生理调节作用,且消除了线虫通过食用大肠杆菌吸收小肽的途径。在第二部分中,以秀丽线虫为模型,以生殖能力为优化DELQ、QEPV和混合肽作用浓度的指标,采用体长和运动能力加以验证其安全性,再采用寿命为依据初步判断其所具有的抗衰老功效。同时,利用压力应激实验和各项生化指标的测定,以推测其所具有的抗衰老功效与抗氧化活性之间的联系,并通过荧光标记肽对其吸收性加以验证。结果表明,(1)400mg/L的DELQ、QEPV和300mg/L的混合肽为最适作用浓度;(2)在体长与运动能力指标上实验组和空白组并无区别,验证了DELQ和QEPV的安全可靠性;(3)实验组的平均寿命、半数死亡时间及最长寿命均显著高于空白组,说明小肽具有良好的抗衰老活性;(4)在热应激条件下,实验组与空白组存活率并无明显提高,而在氧化应激条件下实验组存活率明显高于空白组,MOD、ROS及SOD值均有显著性变化,推测小肽的抗衰老活性有可能是通过提高其抗氧化力、清除自由基来实现的而非提高其热抵抗力;(5)实验组荧光肽吸收强度明显高于空白组,说明线虫能够吸收DELQ和QEPV,为小肽在线虫体内具有抗衰老功效奠定了理论基础。因此,乳源性小肽DELQ和QEPV具有一定的抗衰老功效。
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