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背景与目的：现已证实几乎所有的人体恶性肿瘤都与染色体异常有关。因此，检测食管癌的染色体异常有助于阐明食管癌的癌变机制。HPV18E6E7基因转染人胚食管上皮细胞建立的永生化细胞株H5E973具有恶性变趋向，其61代细胞部分已恶性转化。H5E973细胞株和在H5E973培养传代后加入TPA诱导其恶性转化而建立的瘤细胞株LTPA为体外研究食管癌癌变机制提供了理想模型。本课题以这2个细胞株为实验对象，研究食管上皮细胞永生化及其恶性转化过程中的染色体变化规律，为进一步研究食管癌的分子细胞遗传学异常提供有价值信息。方法：体外传代培养H5E973和LTPA细胞，制备其中期染色体，用胰酶-Giemsa法进行G显带。分析H5E973 26、43、89代和LTPA 63代的染色体众数变化；对H5E973 26、89代和LTPA 63代进行G显带核型分析。此外，利用免疫组化和图象分析技术检测H5E97320、85代及LTPA74代细胞的HPV18 E6、E7蛋白的表达情况。结果：H5E973 26代、43代、89代众数分别为56～62、58～63、61～64，LTPA 63代众数为59～64。H5E973和LTPA细胞主要以超二倍体，尤其是亚三倍体为主。伴随传代次数增加，H5E973细胞众数右移，且亚三倍体也呈增多趋势。12、14、17和20号染色体数目增加和Y染色体的丢失在H5E973 26、89代和LTPA 63代均频繁出现。 在H5E973和LTPA主要发现了18个涉及1、2、4、5、6、7、8、9、10、13、14、19和21号染色体的基本可辨认的结构异常。其中der(4)，t(4；？)(q21；？)、der(5)，t(5；？)(p15；？)、der(10)，t(10；？)(q23；？)、der(13)，t(13；14)(13qer→cen→14qter)、der(14)，t(14；21)(q24；q11)、der(19)，t(19；1)(q12；p13)、21p+、der(？)，t(？；1)(？::1q11→1qter)、der(？)，t(？；1)(？::1q11→1q43)的频繁出现是H5E973 26代、89代及LTPA 63代的共同特征。del(7)(q31)在H5E973 26代、89代频发，但在LTPA 63 汕头大学医学院硕士学位论文代所分析的6 个核 型中去 未见王。der（），＊9；9）（PZ七ql 1）和der（4），t（4；2）（q21；ql2）主要见于H5E973 89代，der（9），t（9；）（qter一cen一qteo主要见于 LIPA63 代，i（7P）和 del（6）（且 1？）、der（13），t（13；13）（qter一 cen－qteo则主要见于 H5E973 89对和 LTPA63代，这 6不异常均较少出现于 H5E97326＊ 中。 H5E973 20． 85代和 LTPA 74代均有 HPVI 8E6、E7蛋白表达，但表达强度有所差异，其中 E6、E7蛋白表达在H5E973 85代的最强，在H5E973 26代相对较弱。上述三代E7蛋白表达均强于E6蛋白。结论上1．5E973、LTPA细胞主要以超二倍体、尤其是亚三倍体为主。H5E973细胞伴随代数增加出现染色体众数方移和亚三倍体增多。 2．12、14、17和 20号染色体数目增加和 Y染色体的丢失在H5E97326、89代和LI’hx 63代均频繁出现，提示其可能与食管上皮细胞永生化和恶性转化相关。 3．der（），t（4；？）（q21；？）、der（），t（5；？）（P15；？）、der（），t（10；？）（q23；？）。der（13），t（13；14） 3qter～cen一14qter）． der（14），t（14；21）（q24；qll）、der（19），＊19；1）（q12p13）、21扒、加r几＊？；1）（卜：lq＊一1呻） 加r（刀，＊t1）（卜：lqll 一lq43）的频繁出现是H5E973 26、89代及LT助 63代的共同特征，可 能在食管上皮细胞永生化和恶性转化中起重要作用。 4 der（9），t（9；9）（P24；ql）、de（），t（9；9）（gqter一 cen＋ gqter）。der（13），t（13二 3）（ 3 qter一cen 一13qter）、del（6）（q21？）、i（7P）和derO），tO上＊qZI；qlZ）由永生化阶段至恶性转化阶段呈现进行性积累，推测上述异常染色体与食管上皮细胞的恶性转化有关。 5．H5E973 20代、85代、LTPA 74代均有 E6、E7蛋白表达，但表达强度有所差异。E6、E7蛋白的表达在 H5E973 85代最强。上述三代E7受白表达均强于E6蛋白。