蠲痹强骨方对CIA大鼠关节炎症与滑膜组织血管翳形成的机理研究

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目的:通过模拟建立类风湿关节炎发病的胶原诱导性关节炎(collagen inducedarthritis,CIA)大鼠模型,进一步深入探讨蠲痹强骨方对CIA大鼠关节炎症与滑膜组织血管翳形成的机理研究,为临床治疗提供实验依据。  方法:通过模拟人的类风湿关节炎发病机制,而建立可靠的类风湿关节炎大鼠模型,即CIA大鼠模型,具体操作为将充分在冰上乳化的牛Ⅱ型胶原注射到Wistar大鼠尾根部1cm之内,14天后观察大鼠发病情况,将已经发病并且关节评分大于2分的CIA大鼠随机分为2组:①无菌生理盐水组即对照组(14只);②蠲痹强骨组(14只),从治疗开始每隔4天分别进行关节炎症评分、大鼠后足趾肿胀度测量以及大鼠体重测量,分别绘制出相应的变化曲线,连续治疗25天后,处死大鼠,运用ELISA技术检测两组大鼠血清中IL-1β、TNF-α含量检测;运用PCR技术和免疫组化技术检测大鼠双膝关节滑膜组织中HIF-1α、INOS、VEGFA相关表达的检测;取大鼠双踝关节进行切片,HE染色,观察大鼠踝关节滑膜增生情况。  结果:1.与无菌生理盐水组相比,蠲痹强骨方组对CIA大鼠关节炎症有明显抑制作用(P<0.05);与无菌生理盐水组相比,蠲痹强骨方组能明显降低CIA大鼠后足趾肿胀度(P<0.05);与无菌生理盐水组相比,蠲痹强骨方组在大鼠体重上没有统计学意义(P>0.05);与无菌生理盐水组相比,蠲痹强骨方组能抑制CIA大鼠血清中IL-1β、TNF-α的表达(P<0.05),2.与无菌生理盐水组相比,蠲痹强骨方组能够明显抑制大鼠滑膜组织中HIF-1α、VEGFAmRNA的表达(P<0.05),但蠲痹强骨方组对大鼠滑膜组织中INOS的表达抑制不明显,在统计学上没有意义(P>0.05),3.与无菌生理盐水组相比,蠲痹强骨方组能够抑制大鼠滑膜组织中HIF-1α、INOS、VEGFA的表达。  结论:1.与无菌生理盐水组相比,蠲痹强骨方组能够明显降低CIA大鼠关节炎症评分及CIA大鼠后足趾肿胀厚度,抑制CIA大鼠滑膜组织中滑膜增生,并且减少血管翳形成,并能够明显抑制CIA大鼠血清中IL-1β、TNF-α的表达,从而达到对CIA大鼠关节炎症的抑制作用。2.蠲痹强骨方在基因水平上都能够抑制CIA大鼠滑膜组织中HIF-1α、INOS、VEGFA的表达,从而进一步达到抑制滑膜组织血管翳形成。3.蠲痹强骨方组能够在蛋白水平上减少HIF-1α、INOS、VEGFA的含量,因此表明,蠲痹强骨方能够抑制HIF-1α、INOS、VEGFA的表达,进而抑制血管翳生成。
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