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目的:检测核内不均一核糖核蛋白(heterogeneousnuclearriboncleproten,hnRNP)K、细胞周期素D1(CyclinD1)和抑癌基因(P53)在非小细胞肺癌(Non-Small Cell Lung Cancer,NSCLC)组织和正常肺组织中的表达,初步探讨它们在NSCLC组织中的发生、侵袭和转移中的作用及关系。方法:利用免疫组织化学SP法检测40例NSCLC组织和20例正常肺组织中hnRNPK、CyclinD1和P53的表达水平.NSCLC组织均为手术切除获得,术前未作任何放疗或化疗。其中,男性29例,女性11例;年龄为28—73岁,<60岁者18例,≥60岁者22例;鳞癌26例,腺癌14例;肿瘤直径≤3cm者15例,>3cm者25例;有淋巴结转移者20例,无淋巴结转移者20例;Ⅰ-Ⅱ期者24例,Ⅲ-Ⅳ期者16例;高一中分化者30例,低分化者10例。标本组织经福尔马林固定,石蜡包埋,4μm厚连续切片,切片常规脱蜡水化后,蒸馏水冲洗,磷酸盐缓冲液(phosphate buffer saline,PBS)浸泡,高温抗原修复3%H202阻断内源性过氧化物酶活性,并用正常山羊血清封闭交叉反应。滴加一抗(兔抗人hnRNPK多克隆抗体,鼠抗人CyclinD1单克隆抗体,鼠抗人P53单克隆抗体)孵育,PBS冲洗后滴加生物素标记二抗孵育,PBS冲洗后滴加辣根酶标记链霉卵白素工作液(S-A/HRP)孵育,PBS冲洗,DAB显色,苏木素复染,透明,封片观察。以胞质或胞核内出现棕黄色颗粒、网织状或棕褐色团块为阳性细胞。其中,hnRNPK蛋白在NSCLC组织中的阳性表达信号主要位于细胞核,少数位于细胞浆;CyclinD1蛋白在NSCLC组织中的阳性表达信号主要位于细胞浆,P53蛋白在NSCLC组织中的阳性表达信号主要位于细胞核。结果:(1)hnRNPK蛋白在NSCLC组织中的表达与在正常肺组织中的表达比较,差异有显著统计学意义(P<0.01),提示在NSCLC组织中的表达明显高于正常肺组织;CyclinD1蛋白在NSCLC组织中的表达与在正常肺组织中的表达比较,差异有显著统计学意义(P<0.01),提示在NSCLC组织中的表达明显高于正常肺组织;P53蛋白在NSCLC组织中的表达与在正常肺组织中的表达比较,差异有显著统计学意义(P<0.01),提示在NSCLC组织中的表达明显高于正常肺组织;(2)hnRNPK蛋白、CyclinD1蛋白及P53蛋白与临床各病理因素的关系如下:hnRNPK蛋白在NSCLC组织中的表达与肿瘤直径和淋巴结转移与否有关,在肿瘤直径>3cm中的表达高于在肿瘤直径≤3cm中的表达,在有淋巴结转移的NSCLC组织中的表达高于无淋巴结转移的NSCLC组织中的表达(P<0.05),但与患者的年龄、性别,肿瘤组织学分型、组织分化程度及TNM分期无关(P>0.05);CyclinD1蛋白在NSCLC组织中的表达与淋巴结转移与否显著有关,有淋巴结转移的表达明显高于无淋巴结转移的表达(P<0.01),与肿瘤直径也有关,在直径>3cm中的表达高于在直径≤3cm中的表达(P<0.05),但与患者的年龄、性别,肿瘤组织学分型、组织分化程度及TNM分期无关(P>0.05);而P53蛋白的表达与肿瘤组织学分型有关,在鳞癌中的表达高于在腺癌中的表达(P<0.05),但与患者的年龄、性别,肿瘤大小、组织分化程度、淋巴结转移与否及TNM分期无关(P>0.05);(3)hnRNPK蛋白与CyclinD1蛋白在NSCLC组织中的表达呈正相关(r=0.379,P=0.016,P<0.05),与P53蛋白在NSCLC组织中的表达无相关性(r=0.115,P=0.479,P>0.05)。(4)CyclinD1蛋白和P53蛋白在NSCLC组织中的表达呈正相关(r=0.075,p=0.029, P<0.05)。结论:(1)hnRNPK蛋白、CyclinD1蛋白和P53蛋白在NSCLC中的表达增高,均显著高于正常肺组织,说明过度表达的hnRNPK蛋白、CyclinD1蛋白和P53蛋白均可能参与了非小细胞肺癌的形成过程。(2)hnRNPK蛋白和CyclinD1蛋白在NSCLC中的表达与肿瘤的直径和淋巴结转移与否有关,但与患者的年龄、性别、肿瘤的组织学分型、组织分化程度和TNM分期无关,提示它们可能不仅在肿瘤的发生过程中发挥作用,而且与肿瘤的进展、侵袭和转移有关;而P53蛋白在NSCLC中的表达与肿瘤组织学分型有关,而与患者的年龄、性别、肿瘤大小、淋巴结转移与否和组织分化程度均无关,提示P53可能仅与肿瘤的早期形成有关。(3)hnRNPK蛋白与CyclinD1蛋白在NSCLC组织中的表达呈正相关,提示hnRNPK可能通过调节细胞周期,导致细胞发生无限增殖,起到致癌作用;与P53蛋白的表达无相关性,说明它们在促进细胞转化,导致肿瘤的发生过程中可能是各自独立发挥作用的。(4)在NSCLC组织中,CyclinD1蛋白与P53蛋白的表达呈正相关,提示两者在肿瘤的发生及形成过程中可能共同发挥协同作用。