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本文选择营养丰富的芹菜叶开发绿色无毒的降血压药物。首先,探索了利用CAMMG公司半自动点样仪Linomat5和扫描仪Scanner-3进行了芹菜素薄层层析法测定芹菜素的最佳条件,并对该测定方法做了精密度实验和稳定性实验。研究得出,薄层色谱法从芹菜黄酮类物质中分离芹菜素的最佳展开体系是“氯仿-甲醇-水体系”,该体系分离效果较好,能将芹菜素与其他黄酮类物质分开。将上述体系中的水换成冰醋酸,各成分配比为:氯仿-甲醇-冰醋酸=13∶1∶0.5时,Rf值为0.67,能将芹菜素与其他黄酮类物质明显分开且展开效果最好;在200~700nm范围内,用CAMAG Scanner3薄层扫描仪对芹菜素斑点进行光谱扫描得到芹菜素的吸收光谱,芹菜素的最大吸收波长是344 nm,因此测定芹菜素时选择344nm为其特征吸收波长;通过winCATS软件处理方法模式不同,标准曲线的变异系数不同,精确度稍有差异,研究知采用多项式模式(Polynomial),按照峰面积(Area)积分方法处理扫描后得到的数据准确度最高。回归方程为:Y=5048.102+25.186X+0.005X2,r=0.99776,sdv=2.32%;测定采用每测一次就附加一个标准曲线,即标和样在同一个硅胶板上点样、展开、扫描,数据处理,确保了数据的准确性;用薄层扫描法测定芹菜素,3个小时内数据稳定性良好,RSD=1.960%,P>0.05。重现性良好,RSD为2.92%,P>0.05。样品平均回收率为97.7%,RSD为1.84%。表明薄层扫描法测定芹菜素切实可行,值得推而广之;薄层扫描法测定芹菜叶中芹菜素含量与高效液相法测定所得值相近,与高效液相法相比,具有对待测样品的纯度要求低,步骤简单,测定周期短等优点。
研究了鲜芹菜中根茎叶三者所占比重、烘干后三者所占比重以及各自的含水量,结果是芹菜茎中含水分最多,根和叶的含水量相当。鲜芹菜中茎的比重最大,为81±2%,根的比重最小为5±1%,叶的比重为14±2%,约为茎重的1/6。将鲜芹菜干燥后,根茎叶占干芹菜的比重则与各部分占鲜重比例相反,叶的比重最高为56.1%,茎的比重和根的比重相当。数据显示,芹菜叶中的营养物质远远超过芹菜茎,其研究价值就远远超过茎,将芹菜叶丢弃是一种巨大的资源浪费。每克芹菜叶中的总黄酮含量约为67.0 mg/g,是茎中含量的8倍多,是根中含量的4倍多,远远高出根和茎。芹菜叶中芹菜素的含量约为76.8mg/100g,约是茎的24倍,根的11多倍。另外,芹菜叶中各种矿质元素、蛋白质、脂肪和纤维素含量丰富。这些数据更有力的说明了芹菜叶的营养价值高于芹菜根和茎。
本文研究了溶剂浸提法和超临界CO2萃取技术两种方法提取芹菜叶中的总黄酮。结果是,浸提法提取总黄酮的最佳工艺为:用70%乙醇在70℃水浴中浸提90 min,物料比为1∶20时,总黄酮的提取率能达到90%以上,效果最佳;用超临界CO2萃取技术提取总黄酮的最佳工艺是30 MPa压力下,55℃的萃取温度,采用CO2的流量为30 Kg.h-1,萃取3h。溶剂浸提法和超临界CO2萃取技术提取总黄酮相比各有优缺点。溶剂浸提对设备要求低,溶剂消耗量大,但处理原料的量相对较小。超临界CO2萃取技术对原料的处理量较大,污染小,节约溶剂,但设备维护麻烦,维修费高。
芹菜素主要是以芹菜苷的形式存在于芹菜中,芹菜苷是苷元加糖链,即芹菜素加糖链。将芹菜提取物酸解后,部分芹菜素就与糖链断开游离出来。在从芹菜总黄酮酸解得到芹菜素的过程中,酸解时间、酸解温度和盐酸用量影响芹菜素的得率,研究结果是:用10%盐酸浓度,在70℃水浴中酸解1.5 h就能使芹菜素的得率达到90%以上。
芹菜素标准品、芹菜黄酮粗提物、芹菜素粗品等实验样品在兔子高血压模型上做降压效果实验,结果显示芹菜素标准品和芹菜素粗品有明显降压效果,降压幅度在15 mmHg以上,芹菜黄酮粗提物的降压效果不明显。说明芹菜提取物中起主要降压作用的是芹菜素。