烟草细胞培养生产辅酶Q及其动力学研究

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:blueblood008
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该实验以黄花烟草(Yellow Bright)无菌苗为材料,通过固态培养和悬浮培养,建立了快速生长的烟草细胞株系,优化了烟草细胞悬浮培养的基本工艺参数,考察了温度、激素、有机物和前体物质对烟草细胞生长和辅酶Q<,10>含量的影响,并建立了培养过程的动力学模型.得到的细胞最佳悬浮培养条件为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 2.0mg/L,接种量8%,蔗糖浓度3%,培养8d可使细胞干重达到36.7g/L.实验发现,25℃是适合细胞生长和辅酶Q<,10>合成的温度.0.5mg/L的IAA虽然不促进细胞生长,却能有效提高辅酶Q<,10>的含量,最高达到9.34mg/L,增幅54.6%.添加一些有机物质对辅酶Q<,10>的合成有促进作用,4.0mg/L的盐酸硫胺素使辅酶Q<,10>的最高含量达到9.96mg/L,比对照样增加65.2%;100mg/L的半胱氨酸使辅酶Q<,10>最高含量达到8.99mg/L.在辅酶Q<,10>合成的前体物质中,2.0mg/L的L-苯丙氨酸能使辅酶Q<,10>含量达到9.35mg/L;3.0mg/L的对羟基苯甲酸能使辅酶Q<,10>含量达到9.92mg/L.在辅酶Q<,10>合成的优化培养基MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 2.0mg/L+IAA 0.5mg/L+盐酸硫胺素4.0mg/L+半胱氨酸100mg/L+L-苯丙氨酸2.0mg/L+对羟基苯甲酸3.0mg/L+茄尼醇0.1mg/L上,建立了烟草细胞生长、底物消耗和辅酶Q<,10>生成的动力学模型,各方程曲线与实验点拟合较好,相关系数均达到99%以上.
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