近年来,越来越多的实验表明,除了多巴胺能递质系统外,非多巴胺递质系统与异动症的发生发展有密切关系,有可能成为治疗异动症LID的新靶点。而纹状体中,伽马氨基丁酸（γ-GABA）能中等多棘神经元和胆碱能中间神经元表达I型代谢型谷氨酸受体,分为两个亚型:代谢性谷氨酸受体1（mGluR1）和代谢性谷氨酸受体5（mGluR5）,这两类受体参与调节皮层-纹状体的外部信号输入及纹状体的内部活性。选择性抑制谷氨酸代谢型受体5（mGluR5）在动物实验中具有良好的抗LID效果,并且基本不影响左旋多巴的抗帕金森效应。另外,近来大量的体内研究表明,间接通路上的纹状体D2受体可通过独立于环磷酸腺苷的路径来激活Akt/GSK3β通路发挥生理效应。Art/GSK3β的信号通路调节异常在许多多巴胺能系统相关的神经病学异常和神经精神病学紊乱中都有重要作用,这一通路的激活可能会整合到谷氨酸受体通路的影响之下。虽然大量临床研究和动物实验均表明,针对mGluR5的拮抗剂具有改善异动症的效应,针对这种调节作用改善异动症的具体机制却鲜有报道,在拮抗mGluR5后,谷氨酸通路活性下调,基底节信号通路转导发生怎样的变化并不明确。本组研究致力于研究mGluR5被拮抗之后,异动症的发生发展中所涉及的相关镶嵌复合体的变化,探究mGluR5拮抗剂所导致的异动症的信号传导通路的改变,最后我们还通过谷氨酸信号通路的下游GSK3β磷酸化的改变以及受体拮抗剂对它的效用,来探索mGluR5拮抗剂针对帕金森病运动并发症改善作用的补充机制,这一系列研究有助于全面把握异动症中mGluR5的参与机制,并为mGluR5剂治疗运动左旋多巴引起的运动并发症提供理论支持,以期开辟异动症治疗的新思路。本课题共分两个部分进行研究:第一部分:mGluR5和NR2B的相互作用及其影响因素I:内源性的相互作用为了初步研究帕金森病大鼠异动症中mGluR5-NR2B结合的变化,和可能影响这种变化的病理生理机制,我们使用了单侧6-OHDA损伤的帕金森大鼠,经阿扑吗啡筛选成功之后连续腹腔注射L-dopa制作异动症大鼠模型,在14天的治疗过程中记录各项行为学评价及数据,取纹状体组织匀浆后做免疫共沉淀检测,我们发现mGluR5和NR2B受体结合水平在长期使用L-dopa治疗的帕金森病异动症大鼠有明显增加,这种应答性的增加会随着两类相应受体的拮抗剂的使用而下降,予以两种结合受体的任一拮抗剂MTEP或者ifenprodil,均可干扰mGluR5-NR2B的结合,导致结合率的下调。II:拮抗mGluR-NR2B的相互作用,导致其下游相关的PKC/MEK/ERK1/2信号通路发生的改变两个世纪以来,帕金森病异动症的经典的疾病理论模型一直强调直接通路与间接通路的功能平衡。在异动症状态下,直接通路和间接通路的活性都明显增高,大大地易化了皮层发出的运动指令,而使用了mGluR5及NR2B的拮抗剂之后,我们发现,提示直接通路和间接通路的活动特性的指标强啡肽和脑啡肽均出现了下调,既往的研究表明,PKC的总表达,ERK1/2及MEK的磷酸化表达水平在长期使用左旋多巴治疗帕金森病异动症的大鼠纹状体内,都会呈现应答性的升高,我们使用这两种受体拮抗剂去抗阻这种相互作用后发现,这些与异动症密切相关的蛋白指标均出现了明显的回调,最后我们同样我们还将各组别的异动症评分与PKC、p-ERK1/2的表达水平的相应灰度值做了相关性分析,发现PKC的表达以及p-ERK1/2的表达,与异动症的评分呈现了线性回归的关系,使用抑制剂对受体相互作用的干预使得这种应答性的升高出现了下降,暗示干预这种mGluR5-NR2B的相互作用可以下调由于应答L-dopa的长期使用所产生的相应蛋白的激活。第二部分:抑制mGluR5通过抑制p GSK3β（Ser9）/GSK3β的比率的升高,来达到下调异动症的目的。长期使用左旋多巴（L-dopa）将导致直接通路的D1受体和间接通路的D2受体均受到刺激,而D2的刺激可以导致Akt/GSK3β信号通路的激活,已有报道表明,p GSK3β（Ser9）/GSK3β的比率在LID的MPTP猴PD模型中呈现上升趋势,这一发现与我们既往的研究一致。本部分中通过使用代谢性谷氨酸受体5的抑制剂MTEP对帕金森病异动症大鼠进行腹腔注射,我们发现谷氨酸代谢型受体5抑制剂MTEP可抑制p GSK3β（Ser9）/GSK3β的比率的上升,改善帕金森病异动症大鼠的AIM评分,改善异动症状。