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水飞蓟宾(Silybin, SLB)具有广泛的药理活性,特别是保肝活性,但目前已上市的SLB制剂均为口服制剂,生物利用度差,大大削弱了其药理作用的发挥,使SLB不能完全表现出其应有的治疗水平。近年来尝试的SLB注射制剂也因载药量低、包封率差、稳定性差、使用安全性差的辅料等问题,迄今尚未有SLB注射剂被批准上市。本课题旨在制备一种乳剂稀释用SLB注射液,以克服其生物利用度低的缺点。拟研究的SLB注射液由SLB的药物溶液与脂肪乳剂两部分组成,临用时将SLB溶液分散到脂肪乳剂中,形成相对稳定的脂肪乳剂分散液。并在制剂制备的基础上,对其进行体内外评价。本文主要包括以下几个部分：1SLB溶液的处方研究首先以SLB溶液在脂肪乳剂中的分散稳定性为指标,从最常用的可注射溶媒,如无水乙醇、丙二醇及PEG400中筛选出最适溶媒,结果显示,同浓度的SLB-PEG400溶液比SLB无水乙醇溶液、SLB丙二醇溶液在脂肪乳剂中的分散稳定性好,故初步拟定以PEG400作为SLB溶媒。以SLB-PEG400溶液在脂肪乳剂中的分散稳定性为指标,筛选SLB-PEG400溶液的浓度和pH调节剂柠檬酸的用量,结果显示,10mg/mL的SLB-PEG400溶液的分散稳定性较更高浓度好,而继续降低SLB的浓度使PEG400的用量增加,从而造成破乳,故拟定SLB-PEG400溶液浓度为10mg/mL。柠檬酸的加入使SLB-PEG400溶液的分散稳定性增加,当SLB-PEG400溶液中柠檬酸用量达到0.5%时,其稳定性明显增加,在25℃下,载药量为0.5mg/mL的水飞蓟宾脂肪乳剂(SLB-LE)能稳定8h,而继续增加柠檬酸的用量,其稳定性无明显变化。而8h的稳定时间能满足用药需求,故拟定柠檬酸酸的用量为0.5%。从而初步确定100mL SLB溶液的处方为：1.00g SLB、0.50g柠檬酸、PEG400定容100mL。2SLB-PEG400溶液的制备及其稳定性考察按照处方用量制备了SLB-PEG400溶液,以SLB含量为指标,对其制备工艺进行验证,结果显示,该制备工艺可行性、可重复性好。在制备SLB-PEG400溶液的基础上,以SLB含量、pH值及外观等为指标,考察其稳定性。结果显示,该制剂灭菌稳定性较好；光照对其影响很小,长时间高温SLB含量有下降的趋势；40℃放置6个月SLB含量约下降5%,30℃下加速稳定性与25℃下长期稳定性较好,SLB含量下降<5%,外观及pH值均无明显变化。因此,SLB-PEG400应在低温下贮存,稳定性较好。3SLB-LE的制备及其稳定性考察将自制的SLB-PEG400溶液均匀分散到脂肪乳剂中,得到载药量分别为0.4mg/mL、0.5mg/mL的SLB-LE.以SLB含量、粒径及pH值、外观为指标,进一步评价25℃下SLB-PEG400溶液在脂肪乳剂中的分散稳定性,以0h SLB含量为100%,随时间取样,经0.45μm滤膜过滤后检测SLB含量,并测定粒径、pH值及观察外观。结果显示,0.4mg/mL、0.5mg/mL SLB-LE稳定时间分别为14h、8h。可见,载药量对乳剂的稳定性影响很大。4SLB-LE的体外释放及相分布研究分别以含0.5%SDS、10%无水乙醇的pH7.8～8.0磷酸盐缓冲液为释放介质,采用透析法考察SLB-LE在24h内的释放情况,结果显示,两种释放介质中,6h SLB释放约80%,10h释放90%以上。以超速离心法分离SLB-LE水相、油相及乳化层,分别测定SLB在三部分的含量,结果显示,SLB主要分布于乳化层中,0.4mg/mL与0.5mg/mL无明显差异,在乳化剂层分布均达到80%以上,而在油相和水相中很少。5SLB-LE的安全性评价参考溶血性试验、刺激性试验及急性毒性试验相应的指导原则中的常规体外试管法(肉眼观察法)、注射给药部位刺激性试验以及最大给药量法分别对SLB-LE的溶血性、刺激性以及急性毒性进行考察,根据上述相应指导原则中的观察方法及结果判断方法及指标判断SLB-LE的溶血性、刺激性及急性毒性。结果显示,SLB-LE未出现溶血及凝血现象,给药部位血管未出现明显的病理损伤,在可达到的最大给药量下未表现出明显的毒性反应,初步判断SLB-LE安全性较好。6SLB-LE药代动力学及组织分布研究为了了解该制剂的体内代谢情况,对SLB-LE在大鼠体内药动学及小鼠体内组织分布进行了研究。药动学结果显示,SLB-LE在大鼠体内半衰期约为0.6h, AUC为1.232μg·h·mL-1;组织分布结果显示,SLB在肝及肾脏中的分布较多,但肾中清除相对较快,肝脏中的AUC最大,为9.327μg·h·mL-1.