目的：探讨毛冬青甲素对大鼠脑缺血再灌注后缺血区周边组织和海马CA1区星形胶质细胞和小胶质细胞激活的调节作用，从而进一步探讨其脑保护作用的可能机制。方法：线栓左侧大脑中动脉阻塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）2h制作SD大鼠短暂局灶性脑缺血模型，实验大鼠随机数字法分成4大组：正常组、假手术组、模型组、毛冬青甲素治疗组（分IA20、40、80mg/kg三个亚组）。参照Longa评分法进行大鼠神经功能缺损评分；TTC染色法观察脑缺血再灌注模型组及治疗组梗死灶情况；免疫组织化学方法和蛋白免疫印迹法检测各组缺血再灌注后不同时段缺血区周边组织和海马CA1区星形胶质细胞标记物GFAP、小胶质细胞标记物Iba-1及神经元干细胞标记物Nestin的阳性细胞数和蛋白表达情况；酶联免疫吸附法（ELISA法）检测海马区TNF-α和IL-1β的含量；并比较治疗组不同剂量（20、40、80mg/kg）的IA干预对大鼠神经功能缺损评分，缺血区周边组织和海马CA1区星形胶质细胞、小胶质细胞激活的影响。结果：（1）模型组与治疗组脑缺血再灌注后1d即出现明显的神经功能缺损症状，随着时间的增加，神经功能缺损症状逐渐改善。治疗组神经功能缺损评分明显低于模型组，其中IA40mg/kg组与IA80mg/kg组的3d、7d、14d，以及IA20mg/kg组的3d、7d与模型组相应时相点比较有显著性差异（P<0.05）。（2）缺血区周边组织细胞情况：正常组及假手术组可见散在的GFAP、Iba-1阳性细胞(以皮层为主)，无Nestin阳性细胞。①模型组GFAP阳性细胞数量再灌注1d后表达增多，7d达到高峰，14d仍持续高表达。随再灌注时间延长，其胞体逐渐肥大，胞质染色加深，突起增粗增长，至再灌注14d时，GFAP阳性细胞突起间相互交织形成网状结构；治疗组GFAP阳性细胞数量表现为1d、3d、7d表达增多，14d表达明显减少，且形态上较模型组变化小，其中3d、7d、14d与模型组相应时间点比较均有显著性差异（P<0.05）。②模型组Iba-1阳性细胞数量再灌注1d后表达增多，7d达到高峰，14d时仍有一定表达，形态上由椭圆形、胞体小、突起多的静止型小胶质细胞逐渐变化为圆形、胞体大、突起少的活化型小胶质细胞或巨噬细胞；治疗组Iba-1阳性细胞各时段表达明显减少，形态上较模型组亦变化小，各时段与模型组相应时间点比较有显著性差异（P<0.05）。③模型组Nestin阳性细胞数量于再灌注后第3d、7d、14d表达明显增多，7d表达最多；治疗组Nestin阳性细胞第3d、7d表达明显增加，与模型组比较有显著性差异（P<0.05）。各治疗组阳性细胞的表达变化均以40mg/kg剂量组最为显著。（3）海马CA1区细胞情况：正常组和假手术组见散在GFAP、Iba-1和Nestin阳性细胞表达。模型组GFAP和Nestin阳性细胞再灌注后3d时表达明显增加，7d达到高峰，14d仍有一定量表达；模型组Iba-1表达与正常组和假手术组比较无显著性差异。治疗组GFAP、Iba-1和Nestin阳性细胞于缺血再灌注后第3d、7d表达较模型组明显增多，7d时表达最多，3d、7d与模型组相应时间点比较有显著性差异（P<0.05）。各治疗组阳性细胞的表达变化均以80mg/kg剂量组最为显著（4）免疫蛋白印迹GFAP、Iba-1与Nestin蛋白表达情况所得结果与免疫组化结果相吻合。（5）ELISA法检测发现，正常组和假手术组有一定量的TNF-α和IL-1β表达；模型组海马区二者表达明显增多，且随着时间的延长逐渐增多，各时段与正常和假手术组比较有显著性差异（P<0.05）；治疗组海马区TNF-α和IL-1β表达较模型组明显减少，以80mg/kg剂量明显，并以第7d、14d较为显著，各时段与模型组相应时间点比较有显著性差异（P<0.05）。结论：1、毛冬青甲素可明显改善脑缺血再灌注后大鼠神经功能，其机制可能通过增强脑缺血再灌注后缺血区周边组织反应性星形胶质细胞的早期激活，并抑制其晚期的过度增殖，以及抑制小胶质细胞的过度活化和促进神经干细胞的增殖，从而为神经元的修复再生提供了有利的条件有关。2、毛冬青甲素可增强局灶性脑缺血再灌注后海马CA1区星形胶质细胞的早期激活，并抑制其晚期的过度增殖，以及激活局灶性脑缺血海马CA1区静止型小胶质细胞和促进神经干细胞的表达，可能对局灶性脑缺血损伤引起的海马CA1选择性易损区的迟发性神经元死亡现象起到一定的脑保护作用。