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‘东农冬麦1号’是目前黑龙江省高寒地区唯一可以安全越冬的冬小麦品种,利用农杆菌介导的遗传转化技术对小麦进行遗传改良具有重要意义。本研究以冬小麦‘东农冬麦1号’为试验材料,进行成熟胚愈伤组织培养及植株再生的研究,探讨了培养基类型、接种方式、添加物组合浓度、2,4-D浓度、6-BA和KT对愈伤组织诱导、分化及植株再生的影响。初步建立了东农冬麦1号成熟胚愈伤组织培养及植株再生体系。对成熟胚愈伤组织进行遗传转化,探讨农杆菌介导的遗传转化中各影响因素对转化效率的影响,初步建立了冬小麦‘东农冬麦1号’的农杆菌介导的遗传转化体系。研究结果如下:(1)通过对冬小麦‘东农冬麦1号’进行成熟胚愈伤组织培养及植株再生试验,结果表明,不同接种方式对成熟胚愈伤组织分化率的影响极显著,胚切伤略带胚乳法>碎胚法>完整胚法。添加物正交试验获得最佳激素配比为100 mg·L-1谷氨酰胺+0.1 mg·L-1 NAA+0.3 g·L-1肌醇+1 g·L-1脯氨酸+0.5 mg·L-1 ABA。2,4-D浓度显著影响成熟胚愈伤组织的分化率和成苗率,随着2,4-D浓度的升高,诱导率呈先升高后降低的趋势,而分化率和成苗率都下降。分化培养基中6-BA对成苗率影响差异极显著,在4 mg·L-1时达到最大;KT对愈伤组织的分化要高于6-BA,但对成苗率的影响明显低于6-BA。该体系所获冬小麦愈伤组织的分化率和成苗率分别可达93.33%和66.64%。初步建立了冬小麦‘东农冬麦1号’成熟胚组织培养及植株再生体系。(2)菌株类型、共培养方式、预培养时间、菌液浓度、侵染时间和共培养时间对冬小麦成熟胚愈伤组织遗传转化效率有很大影响。菌株EHA105的侵染效果比LBA4404更加明显;共培养时愈伤组织进行干燥处理,其GUS稳定表达率比培养基上共培养高出约2.8倍;随着预培养时间的增加,GUS表达率上升;随着菌液浓度和侵染时间的升高,GUS表达率呈现先升高后下降的趋势,在OD值为0.8和侵染3h时达到最大;随着共培养时间的增加,GUS稳定表达率呈现逐渐降低的趋势。通过正交试验获得最优转化方法为预培养18d的愈伤组织,菌液浓度OD值为0.8,侵染时间1h,干燥共培养5d,GUS稳定表达率达到83.33%,初步建立了农杆菌介导的东农冬麦1号成熟胚遗传转化体系。(3)利用建立的农杆菌介导的遗传转化体系,采用携带GUS基因和潮霉素抗性筛选标记的农杆菌,转化‘东农冬麦1号’成熟胚愈伤组织。经过抗性筛选,获得了抗性再生小麦植株,提取转基因植株基因组DNA,PCR检测为阳性,转化效率为2.86%,为‘东农冬麦1号’遗传转化研究奠定了坚实的基础。