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农业害虫是造成农作物减产、危害粮食安全的一个重要原因,但是,由于防治害虫而过度使用化学农药所带来的环境污染、农药残留以及抗药性等问题日益突出。植物源农药以及其他生物源农药和防治手段的应用为解决这一严峻的境况提供了很好的途径。印楝素是一类具有很好杀虫活性的化合物,主要从印楝(Azadirachta indica.A.juss)种仁中提取,已在多个国家登记使用。目前市场上缺乏印楝素标准品/对照品,不能满足印楝素类农药产品质量控制和残留检测等需求。本文利用反相制备高效液相色谱(RP-PHPLC),建立了印楝粗提物中印楝素活性成分对照品的分离制备方法;构建了印楝叶片中印楝素A、B提取、净化和检测方法,初步评价了市售印楝素制剂的质量,主要研究结果如下:1.利用RP-PHPLC方法,从印楝粗提物中分离制备了11种印楝素活性成分,发现1种新化合物;通过NMR和HPLC Q-TOF鉴定了其结构,10种印楝素类化合物分别是印楝素A、B、D、H、I、Nimbin、Deacetylnimbin、Salannin、Deacetylsalannin以及Azadiradione,10种印楝素类成分对照品的纯度均>98%。2.新化合物2H,3H-环戊[b]呋喃[2’,3’:4,5]萘[2,4-d]庚内酯-[3,7]呋喃-6醋酸,3-(乙酰)-8-(3-呋喃)-2a,4a,4b,4c,5,5a,6,6a,8,9,9a,10a,10b-十三氢-2a,5a,6a,5-四甲基-3-[[(2E)-2-甲基-1-氧-2-丁烯]氧]-甲酯也属于印楝素类化合物,将其命名为印楝素R。以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)为靶标,采用刃天青显色-微量稀释法,初步评价了印楝素R的抑菌活性。结果表明,印楝素R对2种供试细菌的MIC值分别为25 mg/L和50 mg/L,MBC值均为50 mg/L,与阳性对照硫酸卡那霉素的抑菌效果相当,其中,印楝素R对枯草芽孢杆菌MIC值低于硫酸卡那霉素,硫酸卡那霉素对供试菌的MIC值及MBC值均为50 mg/L。3.构建了印楝叶片中印楝素A、B的HPLC检测方法。印楝叶片采用甲醇匀浆提取,ENVI-Carb SPE小柱净化印楝叶片提取物。通过HPLC检测,在添加水平为10~30μg/g范围内,印楝素A的平均回收率在86.30%~102.03%之间,相对标准偏差(RSD)在1.03%~4.28%之间;印楝素B的平均回收率为112.98%~127.57%之间,相对标准偏差(RSD)在0.07%~6.13%之间;利用建立的检测方法,检测了30株印楝树叶片,印楝素A、B的含量均低于0.02%。4.利用构建的印楝素检测方法和制备的对照品,初步评价了市场上含印楝素农药产品的质量,结果表明:采集的10种含印楝素产品中,仅1种产品检出印楝素A和印楝素B,其含量为0.28%,与标注含量0.3%相符;其余产品均未检出印楝素A和印楝素B。